[发明专利]新型冠状病毒IgA/IgG抗体联检免疫层析试纸条

说明书

本发明提供一种新型冠状病毒IgA/IgG抗体联检免疫层析试纸条，包括：胶体金吸附垫和抗体承载膜；所述胶体金吸附垫上包被胶体金标记的新型冠状病毒重组抗原和胶体金标记的鼠IgG；所述抗体承载膜上设置有相间隔的检测线T1、检测线T2和质控线C，所述检测线T1包被抗人IgA抗体；检测线T2包被抗人IgG抗体。上述免疫层析试纸条可以同时检测新型冠状病毒IgA和IgG抗体，检测时间短仅为10min，成本低，容易操作，技术性要求低，同时便于现场采集样本(特别是口腔粘膜渗出物)，适用于现场、即时、快速检测。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒IgA/IgG抗体检测试剂盒。

背景技术

冠状病毒是一种包膜RNA病毒，广泛分布于人类、其他哺乳动物和鸟类，可引起呼吸道、肠道、肝脏和神经系统疾病。目前已知有七种冠状病毒会引起人类疾病。四种病毒-229E、OC43、NL63和HKU1-普遍存在，并在免疫能力良好的个体中引起普通感冒症状。其他三种毒株——严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)和2019新型冠状病毒(COVID-19)——是人畜共患型病毒，有时与致命疾病有关。新型冠状病毒暴露2-3周后可检测到IgG和IgA抗体。研究表明IgA在重症患者中表现尤为明显，但随着时间的推移，抗体水平下降，IgG仍然呈阳性。

发明内容

第一方面，本发明提供一种新型冠状病毒IgA/IgG抗体联检免疫层析试纸条，包括：胶体金吸附垫和抗体承载膜；所述胶体金吸附垫上包被胶体金标记的新型冠状病毒重组抗原和胶体金标记的鼠IgG；所述抗体承载膜上设置有相间隔的检测线T1、检测线T2和质控线C，所述检测线T1包被抗人IgA抗体；检测线T2包被抗人IgG抗体。

进一步地，新型冠状病毒重组抗原的序列如SEQ ID NO.1所示。

第二方面，上述的新型冠状病毒IgA/IgG抗体联检免疫层析试纸条在检测或辅助检测待测样品中是否含有新型冠状病毒IgA/IgG抗体中的应用；

进一步地，所述待测样品候选含有新型冠状病毒IgA/IgG抗体；

上述的新型冠状病毒IgA/IgG抗体联检免疫层析试纸条在制备检测或辅助检测待测样品中是否含有新型冠状病毒IgA/IgG抗体产品中的应用，所述待测样品为口腔粘膜渗出物。

口腔粘膜渗出物为用口腔取样器取样端沿受试者上、下牙龈轻轻擦拭。具体为：用口腔取样器从嘴角一处开始，慢慢擦拭至嘴角另一处，再沿龈上线继续擦拭至开始，约需5-6秒。翻转口腔取样器，用口腔取样器取样端另一侧擦拭下龈线，从嘴角的一端开始，慢慢擦拭到另一端，再沿着下龈线继续擦拭至开始，时间为5-6秒；将口腔取样器插入含样品处理溶液的样品提取管中，通过挤压口腔取样器,在样品提取管内壁上下刮6-8次。

进一步地，取样应为口腔粘膜渗出物而非唾液。

第三方面，一种新型冠状病毒IgA/IgG抗体联检免疫层析试纸条的制备方法，包括如下步骤：

将胶体金标记的新型冠状病毒重组抗原和胶体金标记的鼠IgG包被在胶体金吸附垫上；

将抗人IgA单抗、抗人IgG抗体和抗鼠IgG抗体分别包被在抗体承载膜的检测线T1、检测线T2和质控线C上；

将上样垫、胶体金吸附垫、抗体承载膜和吸水垫依次搭接在基片上。

进一步地，所述抗鼠IgG多抗的包被浓度为(1.5～1.8)mg/mL；

抗人IgG抗体的包被浓度为(0.3～0.5)mg/mL；

抗人IgA抗体的包被浓度为(0.3～0.5)mg/mL；

新型冠状病毒重组抗原标记浓度为：(1～2)μg/mL；