[发明专利]一种用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸及制备方法

说明书

本发明提供了一种用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸及制备方法，所述试纸包括底板以及依次搭接在所述底板上的样品垫、金标垫、显色基体、吸水板，所述金标垫包括相连的第一金标垫、第二金标垫，所述第一金标垫经含胶体金标记的鸡IgY复合物的第二处理液浸渍处理；所述第二金标垫经含胶体金标记的新型冠状病毒S蛋白和N蛋白按3～6:1形成的第二处理液浸渍处理。本发明所述用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸的灵敏度、特异性高，且假阳性检出率大大降低，检测结果稳定，且常见疾病的生物性感染源对其检测结果无干扰。

技术领域

本发明涉及免疫诊断技术领域，特别涉及一种用于定性检测新型冠状病毒 IgG/IgM抗体的试纸及制备方法。

背景技术

国家卫健委在2020年3月4日发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗 方案(试行第七版)》，确诊病例在原有核酸检测和测序基础上增加“血 清学检测”作为依据，将血清新型冠状病毒特异性IgM和IgG抗体作 为诊断标准之一。在此背景下，相关的检测试剂也不断被研发出来。 公开号CN111273003A的中国专利，公开了一种新型冠状病毒检测免 疫层析试纸条，是将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜及吸水板顺次相 互搭接地粘结在底板上形成，能够快速检测病人的特异性抗体IgM或 IgG检测；但该试纸仍存在较高的假阴性率，同时检测时容易污染整 张试纸，增加检测人员感染风险。而公开号CN111337669A的中国专 利，公开了一种快速检测新型冠状病毒检测试纸及检测方法，利用双 酶联免疫吸附来特异性捕捉结合冠状病毒蛋白抗原，再通过化学显色 进行判断；但该试纸操作繁琐、准确性差，同时需要配合酶标仪完成 检测，无法快速得到结果，同时容易受其他病毒或生物大分子干扰。

面对日益严峻的疫情，仍有很多疑似病例因检测能力不够而不能确诊，如何大规模快速筛查出疑似病例，提高检测准确性、安全性，为临床医生提供快速的诊断依据，是目前亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提出一种用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸及制备方法，以实现大规模、准确快速的筛查，提高检测准确性、安全性。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸，包括底板以及依次搭接在所述底板上的样品垫、金标垫、显色基体、吸水板，所述金标垫包括相连的第一金标垫、第二金标垫，所述第一金标垫经含胶体金标记的鸡IgY复合物的第二处理液浸渍处理；所述第二金标垫经含胶体金标记的新型冠状病毒S 蛋白和N蛋白按3～6:1形成的第三处理液浸渍处理。该设置可避免胶体金标记的复合物等关键试剂之间的相互干扰以及避免不同试剂由于分子量大小、物理性质等参数不同导致喷涂不均匀，提高检测的准确性。优选的，所述新型冠状病毒S蛋白的表达系统是HEK293(人胚胎肾细胞)，所述新型冠状病毒N蛋白的表达系统是原核表达系统(大肠杆菌)。

进一步的，所述第一金标垫位于靠近所述样品垫的一侧，所述样品垫和所述第一金标垫之间还设有滤血膜。该设置可避免病毒颗粒进入金标垫及显色基体，降低试纸传播病毒的风险，提高检测的安全性。作为本发明的另一个示例，所述第一金标垫位于靠近显色基体的一侧。所述滤血膜、吸水板均为现有技术，在此不进行赘述。

更进一步的，所述显色基体上间隔设有第一检测线、第二检测线、质控线，所述第一检测线上喷涂有浓度0.1～0.5mg/mL鼠抗人IgM单抗，所述第二检测线喷涂有浓度为1.0～2.0mg/mL的鼠抗人IgG单抗，所述质控线上喷涂有浓度为1.0～2.0mg/mL羊抗鸡IgY多克隆抗体。其中，所述质控线、第二检测线、第一检测线的相对位置可调。作为本发明的一个示例，所述质控线设在靠近所述吸水板的一端，所述第一检测线设在所述第二检测线和质控线之间。优选的，所述第二检测线设在第一检测线和质控线之间，有利于IgM的快速和高灵敏度的检测，阳性检出率更高。所述相邻的第一检测线、第二检测、质控线之间的间距分别为3～5mm。