[发明专利]一种用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸及制备方法

权利要求书

1.一种用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸，包括底板(9)以及依次搭接在所述底板(9)上的样品垫(1)、金标垫(3)、显色基体(4)、吸水板(8)，其特征在于，所述金标垫(3)包括相连的第一金标垫(31)、第二金标垫(32)，所述第一金标垫(31)经含胶体金标记的鸡IgY复合物的第二处理液浸渍处理；所述第二金标垫(32)经含胶体金标记的新型冠状病毒S蛋白和N蛋白按3～6:1形成的第三处理液浸渍处理。

2.根据权利要求1所述的用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸，其特征在于，所述第一金标垫(31)位于靠近所述样品垫(1)的一侧，所述样品垫(1)和所述第一金标垫(31)之间还设有滤血膜(2)。

3.根据权利要求1或2所述的用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸，其特征在于，所述显色基体(3)上间隔设有第一检测线(5)、第二检测线(6)、质控线(7)，所述第一检测线(5)上喷涂有浓度0.1～0.5mg/mL鼠抗人IgM单抗，所述第二检测线(6)喷涂有浓度为1.0～2.0mg/mL的鼠抗人IgG单抗，所述质控线(7)上喷涂有浓度为1.0～2.0mg/mL羊抗鸡IgY多克隆抗体。

4.根据权利要求3所述的用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸，其特征在于，所述底板(9)为PVC板；所述显色基体(3)为硝酸纤维素膜。

5.一种用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸的制备方法，其特征在于，包括：

S1、样品垫(1)的制备：用硼酸：硼砂：S-9：酪蛋白按比例4～8:10～20:40～60:40～60配置第一处理液，将第一膜材料放入所述处理液中浸渍处理，烘干得到样品垫；

S2、金标垫(3)的制备：将胶体金标记的鸡IgY制备的第二处理液喷涂在第二膜材料上，干燥后得第一金标垫(31)；将胶体金标记的新型冠状病毒S蛋白和N蛋白制得的第三处理液喷涂在玻纤上，干燥后得到第二金标垫(32)；

S3、显色基体(4)的制备：分别将鼠抗人IgM单抗、鼠抗人IgG单抗、羊抗鸡IgY间隔的包被在第三膜材料上形成第一检测线(5)、第二检测线(6)、质控线(7)，所述第一检测线(5)、第二检测线(6)、质控线(7)之间间隔1～6mm；

S4、组装将滤血膜(2)、吸水板(8)以及制得的样品垫(1)、金标垫(3)、显色基体(4)按序粘贴在底板(9)上的固定位置，分切即得。

6.根据权利要求5所述的用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述处理液的组分为0.06％硼酸、0.15％硼砂、0.5％酪蛋白、0.5％S-9，余量为水。

7.根据权利要求5所述的用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述第三处理液的制备方法包括：

S21、胶体金制备：取0.01-0.03ml氯金酸加入到100mL纯化水中，加热至沸腾，再加入1.5-4mL1％柠檬酸三钠混匀，煮沸待胶体金颜色变成酒红色后，冷却；

S22、S蛋白金标液制备：取1mL步骤S21制备的胶体金，加入10-40μL0.1M碳酸钾后混匀，调pH至8.2-9.5；再依次加入0.5-1μg的新型冠状病毒S蛋白、50-100μL10％的牛血清白蛋白，分别混匀；

S23、N蛋白金标液制备：取1mL步骤S21制备的胶体金加入10-40μL0.1M碳酸钾混匀，调整pH至8.2-9.5，再依次加入0.5-1μg的新型冠状病毒N蛋白、50-100μL10％的牛血清白蛋白，分别混匀；

S24、金标液的纯化：分别将步骤S22制备的S蛋白金标液和步骤S23制备的N蛋白金标液离心，弃除上清，再加入金标复溶液复溶，即得。

8.根据权利要求7所述的用于定性检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的试纸的制备方法，其特征在于，所述步骤S23中，将所述新型冠状病毒N蛋白一次性加入，之后以100-300rpm搅拌15-30min。