[发明专利]一种检测蔬菜水果中蛔虫卵的引物及其方法和应用有效
申请号: | 202010717608.1 | 申请日: | 2020-07-23 |
公开(公告)号: | CN111808971B | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 谢跃;李泓燠;童晓芳;刘云健;刘宇昕;李峙昕;邹雪;李选凯;周璇;李莹馨 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 刘妮 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 蔬菜水果 蛔虫 引物 及其 方法 应用 | ||
1.一种检测蔬菜水果中蛔虫卵的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取待测样品基因组DNA;
2)使用引物As/To_F和As/To_R进行PCR扩增;
3)凝胶电泳检测,于凝胶成像系统下拍照检测,存在628 bp的DNA特异性条带,则确定样品中含有蛔虫卵;所述蛔虫卵为猪蛔虫卵和犬弓首蛔虫卵;
所述待测样品为水果或者蔬菜;
所述提取待测样品基因组DNA的方法为CTAB提取法;
所述引物序列为:
As/To_F:5’-CCTGATATGAGTTTTCCTCGTT-3’;
As/To_R:5’-CAAGATCCATACCAACAGTATACAT-3’;
所述PCR扩增反应体系为10μL:2×Taq PCR Master Mix 5μL、As/To_F 0.5μL、As/To_R0.5μL、DNA模板0.5μL,补水至总容积10μL;
所述PCR扩增反应程序为:95℃预变性5min,95℃变性30s,52.8℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环;72℃延伸10min。
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