[发明专利]柯萨奇病毒A7的病毒样颗粒及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202010690365.7 | 申请日： | 2020-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN112011572B | 公开（公告）日： | 2022-05-06 |
| 发明（设计）人： | 朱朗;李雅静;阴彦辉;马铭江;吕哲;高强 | 申请（专利权）人： | 北京科兴生物制品有限公司;北京科兴中维生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866;C07K14/085;G01N33/569;A61K39/125;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京睿阳联合知识产权代理有限公司 11758 | 代理人： | 王莹;张颖 |
| 地址： | 100085 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 柯萨奇 病毒 a7 颗粒 及其 制备 方法 应用 | ||
1.重组杆状病毒表达载体，其特征在于，所述表达载体具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体进一步包含AcMNPV p10启动子和/或polyhedrin启动子。
3.柯萨奇病毒A7的病毒样颗粒的表达系统，其特征在于，所述表达系统包含权利要求1或2所述的表达载体，所述表达系统为昆虫细胞。
4.根据权利要求3所述的表达系统，其特征在于，所述昆虫细胞是Sf9昆虫细胞。
5.具有免疫原性的柯萨奇病毒A7的病毒样颗粒，其特征在于，所述病毒样颗粒具有SEQID NO.3所示的氨基酸序列的P1蛋白和SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列的3CD蛋白；
所述柯萨奇病毒A7的病毒样颗粒通过如下步骤制备：
(1)构建包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的表达载体；
(2)利用所述表达载体转化具有杆状病毒骨架的大肠杆菌，获得杆粒；
(3)用步骤(2)获得的杆粒感染昆虫细胞进行表达，得到所述柯萨奇病毒A7的病毒样颗粒。
6.制备权利要求5所述的柯萨奇病毒A7的病毒样颗粒的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)构建包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的表达载体；
(2)利用所述表达载体转化具有杆状病毒骨架的大肠杆菌，获得杆粒；
(3)用步骤(2)获得的杆粒感染昆虫细胞进行表达，得到所述柯萨奇病毒A7的病毒样颗粒。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述表达载体进一步包含AcMNPV p10启动子和/或polyhedrin启动子。
8.权利要求5所述的病毒样颗粒或权利要求6或7所述的制备方法制备的病毒样颗粒在制备预防手足口病的病毒感染的疫苗中的应用。
9.权利要求5所述的病毒样颗粒或权利要求6或7所述的制备方法制备的病毒样颗粒作为抗原在制备手足口病的病毒感染免疫检测试剂盒中的应用。
10.预防手足口病的病毒感染的疫苗，其特征在于，所述疫苗通过权利要求5所述的病毒样颗粒或权利要求6或7所述的制备方法制备的病毒样颗粒制备。
11.手足口病的病毒感染免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒通过权利要求5所述的病毒样颗粒或权利要求6或7所述的制备方法制备的病毒样颗粒作为抗原制备。
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