[发明专利]一种母乳α-淀粉酶活性检测方法在审
| 申请号： | 202010619456.1 | 申请日： | 2020-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN111676268A | 公开（公告）日： | 2020-09-18 |
| 发明（设计）人： | 李达;康学军 | 申请（专利权）人： | 李达 |
| 主分类号： | C12Q1/40 | 分类号： | C12Q1/40;G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210096*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 母乳 淀粉酶 活性 检测 方法 | ||
1.一种母乳α-淀粉酶活性检测方法，其特征在于，包括如下步骤：将新鲜母乳样本与饱和硫酸铵溶液混合，充分震荡摇匀后，离心取清液，然后运用碘-淀粉比色法实现母乳α-淀粉酶活性测定。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，新鲜母乳与饱和硫酸铵溶液的体积比为1:1～1:5。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，震荡条件为：涡旋仪上震荡1～5min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，离心条件为离心2～10min，设定转速为2000～10000r/min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)吸取1ml新鲜母乳于4ml规格塑料试管中，再加入1ml饱和硫酸铵溶液；
(2)将该塑料试管放于涡旋仪上震荡1min，充分混匀；
(3)将塑料试管放入离心机内离心5min，设定转速为5000r/min；
(4)取离心后清液100μl于玻璃比色皿中，其中，所述玻璃比色皿中含2ml浓度为0.8mg/ml淀粉溶液；
(5)在避光条件下滴入碘/碘化钾溶液，反应5～20min；
(6)迅速放入可见分光光度仪中，读取吸光度值Abs；
(7)将吸光度值Abs代入计算公式求取母乳α-淀粉酶活性值。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，以加入2ml浓度为0.8mg/ml淀粉溶液计，母乳α-淀粉酶活性值AMY的计算公式为(单位U/L)：
其中，代表测定管淀粉的水解程度，大小范围为0～1，含义为在实验条件下，100μl离心清液中的淀粉酶在15分钟内水解0.4mg淀粉，则其活性为800个单位。
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