[发明专利]一种可识别混合物对复杂生物体系的鉴别方法在审
| 申请号： | 202010594829.4 | 申请日： | 2020-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN112143783A | 公开（公告）日： | 2020-12-29 |
| 发明（设计）人： | 李进;朱俊扬;窦登峰;巩晓明;陈秋霞;张丽芳 | 申请（专利权）人： | 成都先导药物开发股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12Q1/686;C12Q1/6888;C12Q1/689;C12Q1/6895 |
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| 地址： | 610200 四川省成都市双*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 识别 混合物 复杂 生物 体系 鉴别方法 | ||
1.一种可识别混合物对复杂生物体系的鉴别方法，包含以下步骤：
a、取不同复杂生物体系样本；
b、将相同的可识别混合物分别和不同复杂生物体系样本在缓冲液中混合孵育；
c、分离除去未结合的混合物组分，得到与复杂生物体系样本结合的可识别混合物组分；
d、识别对比混合物组分的特征参数，作为各复杂生物体系样本的鉴别。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述可识别混合物是指混合物中的全部或部分可识别。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述可识别混合物中的不同的可识别组分大于10种。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述可识别混合物中可识别的部分通过标签来识别。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述标签为核酸、肽链、肽核酸、荧光标记或同位素标记。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述可识别混合物中可识别的部分为DNA编码化合物。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述复杂生物体系为生物组织、生物器官、血液、体液、菌群。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤d中特征参数包含混合物可识别组分的组成和含量。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法为一种DNA编码化合物库对复杂生物体系的鉴别方法，包含以下步骤：
a、取不同复杂生物体系样本；
b、将相同的DNA编码化合物库和不同复杂生物体系样本置于缓冲液中混合孵育；
c、分离除去未结合的DNA编码化合物，得到与复杂生物体系样本结合的DNA编码化合物；
d、识别对比DNA编码化合物的组成和含量，作为各复杂生物体系样本的鉴别。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤a中复杂生物体系样本需进行冰冻切片。
11.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤a～c的操作在0～4℃下进行。
12.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤b中的缓冲液含有ssDNA(鲑鱼精DNA)。
13.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤c中通过离心分离除去未结合的DNA编码化合物。
14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于：步骤c中还包括多次加入洗脱缓冲液离心。
15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于：所述洗脱缓冲液不含有ssDNA(鲑鱼精DNA)。
16.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤c中通过加热后离心，以得到与复杂生物体系样本结合的DNA编码化合物。
17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于：加热温度为65～100℃，并维持10～30分钟。
18.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤d中通过对DNA编码化合物的DNA标签进行PCR扩增和DNA测序，从而识别DNA编码化合物的组成和含量。
19.根据权利要求18所述的方法，其特征在于：测序前通过qPCR定量DNA编码化合物的分子数，如果qPCR定量的DNA编码化合物的分子数大于108，则用步骤c得到的DNA编码化合物替代步骤b中的DNA编码化合物库，并重复步骤b至步骤c的操作。
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