[发明专利]用于检测COVID-19病毒的RT-RAA引物对和诊断试剂盒有效
| 申请号: | 202010578160.X | 申请日: | 2020-06-22 |
| 公开(公告)号: | CN111647690B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
| 发明(设计)人: | 刘丹;杨朝勇;刁勇;张语倩;沈海聪;成志云 | 申请(专利权)人: | 华侨大学;厦门大学 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6848;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 上海市海华永泰律师事务所 31302 | 代理人: | 包文超;李焓 |
| 地址: | 362021 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 检测 covid 19 病毒 rt raa 引物 诊断 试剂盒 | ||
1.一种基于RAA检测COVID-19病毒的引物对,其特征在于,上游引物包括SEQ No 1所示的核酸序列,下游引物包括SEQ No 2所示的核酸序列。
2.根据权利要求1所述的引物对,其特征在于在所述的上游引物的5’端结合荧光标记,所述的下游引物的5’端结合耦合标记。
3.根据权利要求1所述的引物对,其特征在于在上游引物的5’端结合荧光标记,所述的下游引物的5’端结合生物素。
4.根据权利要求1~3之一所述的引物对在制备检测COVID-19病毒的诊断试剂盒中的应用。
5.根据权利要求1~3之一所述的引物对,其特征在于按如下方法对样本实施核酸扩增:
将分子拥挤试剂、核酸扩增启动剂、反应干粉酶制剂和扩增引物对共混后,置入37~42℃恒温箱,扩增3~7分钟后取出,充分混匀,掌式低速离心10秒,再置入37~42℃恒温箱继续扩增, 10分钟~20分钟后,结束反应。
6.根据权利要求1~3之一所述的引物对,其特征在于按如下方法对样本实施核酸扩增:
将分子拥挤试剂、核酸扩增启动剂、反应干粉酶制剂和扩增引物对共混后,置入42℃恒温箱,扩增6分钟后取出,充分混匀,掌式低速离心10秒,再置入37~42℃恒温箱继续扩增,16分钟后,结束反应。
7.一种试剂盒,其特征在于包括权利要求1~3之一所述的引物对。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于还包括分子拥挤试剂、核酸扩增启动剂和反应干粉酶试剂。
9.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于还包括说明书,其上记载如下扩增步骤:
将分子拥挤试剂、核酸扩增启动剂、反应干粉酶制剂和扩增引物对共混后,置入37~42℃恒温箱,扩增10~30分钟后,结束反应。
10.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于还包括说明书,其上记载如下扩增步骤:
将分子拥挤试剂、核酸扩增启动剂、反应干粉酶制剂和扩增引物对共混后,置入37~42℃恒温箱,扩增3~7分钟后取出,充分混匀,掌式低速离心10秒,再置入37~42℃恒温箱继续扩增, 10分钟~20分钟后,结束反应。
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