[发明专利]达玛烷型皂苷制备方法及其在制备降糖和抗炎药物、保健品中的应用

说明书

本发明公开了一种达玛烷型皂苷制备方法及其在制备降糖和抗炎药物、保健品中的应用。达玛烷型皂苷制采用如下操作步骤制备：S1：取10kg干燥的青钱柳叶，加入75%乙醇水溶液，依次加热回流提取3次，时间为3小时、2小时、2小时，合并滤液，减压回收乙醇，得浸膏2.10kg；S2：取浸膏1.5kg悬浮于20L水中，经D101大孔吸附树脂色谱柱吸附，用水清洗，然后用30%、95％乙醇洗脱，分别得到30%、95％乙醇洗脱物250g、625.0g，该洗脱物作为富含达玛烷型三萜皂苷的青钱柳叶提取物。本发明提供的大部分达玛烷型三萜皂苷化合物均能抑制α‑糖苷酶和抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞中一氧化氮的释放，显示良好的降糖和抗炎活性，且具有浓度依赖性，可用于开发降糖和抗炎的相关药物和保健品。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种达玛烷型皂苷制备方法及其在制备降糖和抗炎药物、保健品中的应用。

背景技术

研究表明，2型糖尿病与细胞因子介导的炎症反应有关，是一种先天的免疫性疾病，炎症在2型糖尿病的发病机制中起媒介作用，此观点被称之为糖尿病“炎症学说”。2005年在美国糖尿病协会会议上，此学说得到了广泛认可，“炎症与2型糖尿病”的关系已成为全球内分泌学者共同关注的热点。

2型糖尿病发病时，病人体内NO、iNOS﹑NF-κB﹑COX-2﹑IL-6﹑IL-1β﹑TNF-α的内源性mRNA的水平显著升高，降糖药物不仅降低病人体内血糖水平，也抑制病人体内NO、TNF-α、IL-6和NF-κB/p65表达，有试验证明抗炎治疗可明显改善2型糖尿病患者糖代谢的异常。

青钱柳为胡桃科青钱柳属植物，为我国特有的植物，是常用药食两用植物，产于江西、广西、贵州、湖南、湖北等南方省。青钱柳性味辛、微苦、平，具有祛风止痒，抗炎降糖的功效，用药历史悠久。

青钱柳的主要化学成分包括达玛烷型皂苷、黄酮类、酚酸类，其中达玛烷型三萜是青钱柳的指标和活性成分。现代药理学研究表明，青钱柳粗提物具有降血糖、抗炎、降血压、降血脂、抗肿瘤、抗氧化、抑菌等作用。

青钱柳叶具有降血糖、抗炎的功效，但其中的降血糖、抗炎物质基础不清，作用机制不明，阻碍了青钱柳叶的深入利用开发。青钱柳叶提取物具有显著的抗炎和降血糖作用，在LPS活化巨噬细胞体外炎症模型上，发现青钱柳叶提取物抗炎效果显著。在四氧嘧啶小鼠糖尿病模型上，发现青钱柳醇提取物具有降血糖作用，其降血糖作用可能与恢复受损的胰岛结构和功能及影响糖的代谢有关；很多研究也都发现水提物、醇提取物都具有降糖作用。临床研究发现，青钱柳制剂降血糖作用显著，而对正常血糖无影响，无毒副作用，与降糖药物有协同作用，对消除糖尿病症状，防治并发症和降糖药毒副作用有较好效果。日本学者发现青钱柳提取物体外可抑制α-葡萄糖苷酶的活性，推测青钱柳可能是通过抑制葡萄糖的吸收而降低血糖，体内可以降低口服蔗糖和淀粉的小鼠血糖水平，在遗传高血糖模型小鼠KK-A上也可显著降低血糖。但是，关于青钱柳中单体化合物降血糖、抗炎的活性研究报道很少。

从青钱柳中得到的达玛烷型皂苷具有抑制α-糖苷酶的活性，抑制炎症细胞中NO的产生，降低iNOS﹑NF-κB﹑COX-2﹑IL-6﹑IL-1β﹑TNF-α的内源性mRNA水平的释放，阻止iNOS、COX-2和NF-κB/p65蛋白的表达，显示良好的降糖和抗炎活性，可用于开发降糖和抗炎的相关药物、保健品。

发明内容

本发明的目的在于通过多种提取、分离手段，从青钱柳叶中提取、分离并鉴定具有降糖和抗炎作用的活性单体化合物，及其在制备降糖和抗炎药物、保健品中的应用。

本发明的目的是通过如下的技术方案实现的：利用多种提取、分离手段，包括溶剂提取法、溶剂萃取法、大孔吸附树脂法、正反硅胶柱层析、凝胶柱层析和制备HPLC等方法，系统研究了青钱柳叶的化学成分。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种达玛烷型皂苷在制备降糖和抗炎药物、保健品中的应用，包括通式(I)所示的达玛烷型三萜皂苷或其可药用的盐：