[发明专利]Nr4a3在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用

说明书

本发明公开Nr4a3在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用；所述神经损伤为周围神经系统坐骨神经损伤。所述药物以Nr4a3作为分子干预靶点，干扰Nr4a3，促进DRG神经元轴突生长。本发明还公开一种促进神经再生和修复神经损伤药物，所述药物至少包括Nr4a3的小干扰RNA。本发明另外还公开Nr4a3在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用，其特征在于，包括以下过程：S1、大鼠DRG神经元体外培养并检测其中Nr4a3的表达情况；S2、体外干扰Nr4a3，能够促进DRG神经元轴突生长。本发明以Nr4a3作为分子干预靶点，干扰Nr4a3，促进DRG神经元轴突生长，为神经损伤后的治疗提供新的靶点。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及Nr4a3在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用；具体涉及Nr4a3在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用、Nr4a3在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用及Nr4a3在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用。

背景技术

周围神经受损后可以自发的再生，但由于再生速度有限，功能难以恢复，致残率高，给社会及家庭造成了极大的经济和伦理负担。充分深入的理解周围神经损伤再生的细胞与分子机制，有助于提高周围神经功能修复的成功率，同时这也为解决中枢神经系统再生中遇到的问题提供参考，具有重大的理论基础和潜在的临床价值。本发明探索基因Nr4a3在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在问题或不足，本发明提供一种Nr4a3在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用。

为实现上述发明目的，本发明的实施例提供Nr4a3在制备促进神经再生和修复神经损伤药物中的应用。

进一步的，所述神经损伤为周围神经系统坐骨神经损伤。

进一步的，所述药物以Nr4a3作为分子干预靶点，干扰Nr4a3，促进DRG神经元轴突生长。

本发明的实施例还一种促进神经再生和修复神经损伤药物，其特征在于，所述药物至少包括Nr4a3的小干扰RNA。

进一步的，所述Nr4a3的小干扰RNA包括Nr4a3 siRNA-1或Nr4a3 siRNA-2，所述Nr4a3 siRNA-1序列为GCGTACAGATAGTCTGAAA，所述Nr4a3siRNA-2序列为GCCTTTGATCAAGATGGAA。

本发明的实施例另外还Nr4a3在促进神经再生和修复神经损伤方面的应用，其特征在于，包括以下过程：S1、大鼠DRG 神经元体外培养并检测其中Nr4a3的表达情况；S2、体外干扰Nr4a3，能够促进DRG神经元轴突生长。

其中，所述步骤S1具体包括以下过程：

S1-1、原代DRG神经元细胞的提取

S1-1-1、DRG 神经元来自成年雄性大鼠，将背根神经节取出后放到解剖液 HA 中，加3.3 mg/ml 胶原酶消化，37 ℃，90 min；

S1-1-2、弃胶原酶，加 0.25%的胰酶消化，37 ℃，20 min；

S1-1-3、用含有10%胎牛血清的 PBS 终止胰酶作用，离心后弃上清；

S1-1-4、用 15%的牛血清白蛋白悬浮细胞后离心，弃掉上清；

S1-1-5、用神经元培养基重悬细胞，过200目筛网后种到用多聚赖氨酸包被的板孔里；

S1-2、DRG细胞RNA提取及qRT-PCR

S1-2-1、收取体外培养不同时间点的DRG神经元细胞，提取RNA；

S1-2-2、使用 TaqMan 反转录试剂盒进行逆转录；