[发明专利]一种高通量快速测定稻米酶解量的方法在审
申请号: | 202010543579.1 | 申请日: | 2020-06-15 |
公开(公告)号: | CN111733210A | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 潘立旭;刘巧泉;张昌泉;李钱峰;范晓磊;赵冬生 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12Q1/54 | 分类号: | C12Q1/54;C12Q1/40;C12Q1/37 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 许亦琳;余明伟 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 通量 快速 测定 稻米 酶解量 方法 | ||
1.一种高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,所述方法至少包括如下步骤:
(1)预处理:将米粉和乙酸钠缓冲液置于96孔深孔板中,预热后进行离心;所述米粉是指粉状稻米;
(2)体外消化反应:使用多通道移液器将消化缓冲液加入到步骤(1)的96孔深孔板中,计时并搅拌,每隔一定时间进行取样,将样本置于96孔PCR板中,向96孔PCR板中加入酒精结束反应,获得各时间点的反应样本;
(3)酶解量测定:使用多通道移液器将各时间点的反应样本移至96孔酶标板中,测定各时间点的反应样本的葡萄糖浓度,根据公式(I)获得每次取样时的稻米的酶解量;
酶解量=葡萄糖浓度*0.9/样本质量*100% (I)。
2.如权利要求1所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,步骤(1)中,预热时,使用磁力搅拌器对米粉和乙酸钠缓冲液进行搅拌。
3.如权利要求1所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述米粉选自原米粉,糊化米粉或回生米粉。
4.如权利要求1所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,步骤(2)中,搅拌方式为磁力搅拌。
5.如权利要求2或4所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,磁力搅拌的转速为600rpm。
6.如权利要求1所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述体外消化反应于37℃水浴环境中进行。
7.如权利要求6所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,步骤(2)中,取样时,将96孔深孔板从水浴环境中取出,离心,吸取定量样本后,加入等量的乙酸钠缓冲液于96孔深孔板中,放入37℃水浴环境重新开始计时。
8.如权利要求1所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述酒精为50%酒精。
9.如权利要求1所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法,其特征在于,步骤(3)中,根据反应样本的吸光度,根据公式(II),测定反应样本的葡萄糖浓度;
葡萄糖浓度=[(样本吸光值-空板吸光值)/(标样吸光值-空板吸光值)]*17+n*0.02 (II)
n:上次测量的浓度。
10.如权利要求1-9任一所述所述的高通量快速测定稻米酶解量的方法用于模拟稻米体内的消化情况中的用途。
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