[发明专利]一种蝴蝶兰软腐病抗性鉴定方法

权利要求书

1.一种蝴蝶兰软腐病抗性鉴定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1病原菌分离和准备，获取蝴蝶兰软腐病样品，按常规消毒，再用无菌刀将病健交接处的组织切成薄片移到NA培养基上培养，经分离纯化，并经柯赫氏法则验证确定；于32℃下在NA平板上培养，获病原菌纯培养；将病原菌株接种于NA培养液，在32℃转速150r/min培养36h，用无菌水配制成10⁶-10⁷CFU/mL的细菌悬浮液；

S2将灭菌后的滤纸置于培养皿中，喷无菌水至滤纸湿润后备用；

S3品种准备，选28个蝴蝶兰品种，每品种准备5片叶子，大小直径为50mm-70mm，清洗晾干后用质量浓度75％的酒精消毒，用高感软腐病GD1做对照；将消毒后的蝴蝶兰叶片分别置于保湿好的消毒平板中；

S4接种鉴定，用无菌大头针在叶片中央密集轻刺5下，在针刺处滴0.2mL步骤S1获得的细菌悬浮液，每个处理4次重复，每个重复5片叶；

S5调查评价，放入磁盘中保湿密封，30℃黑暗培养。当叶片出现水渍状病斑时，每24h观察并记录叶片发病情况；

S6按分级标准进行分级并计算病情指数，根据病情指数进行品种的抗感特性评价。

2.根据权利要求1所述的蝴蝶兰软腐病抗性鉴定方法，其特征在于，蝴蝶兰品种软腐病病抗性水平按照以下标准进行确定：

高抗：病情指数≤20；

抗病：20＜病情指数≤40；

中抗：40＜病情指数≤60；

感病：60＜病情指数≤80；

高感：80＜病情指数。

3.根据权利要求1所述的蝴蝶兰软腐病抗性鉴定方法，其特征在于，分级标准是：

0级，针刺处无水渍状病斑；1级，针刺处见水渍状病斑，病斑不扩散到针刺范围外0.2cm距离外；

2级病斑扩散到针刺范围外0.2cm距离外，同时病斑面积≤25％叶片面积；

3级，25％叶片面积＜病斑面积≤50％叶片面积；

4级，50％叶片面积＜病斑面积≤75％叶片面积；

5级，75％叶片面积＜病斑面积。

4.根据权利要求1所述的蝴蝶兰软腐病抗性鉴定方法，其特征在于，病情指数计算公式为：