[发明专利]一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子及制备与应用

权利要求书

1.一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子具有核壳结构，以富硒黑豆11S蛋白为核，绿原酸接枝壳聚糖为壳；所述方法包括以下步骤：

(1)提取11S富硒黑豆蛋白；

(2)绿原酸自由基接枝壳聚糖改性得到绿原酸接枝壳聚糖；

(3)将步骤(1)的11S 富硒黑豆蛋白与步骤(2)的绿原酸接枝壳聚糖复合，得到pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子；复合方法为搅拌混合或糖化反应。

2.根据权利要求1所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤(1)中提取11S富硒黑豆蛋白的方法为：

富硒黑豆浸泡后低温粉碎处理，得到的粉末与水混匀、脱脂，风干获得富硒黑豆脱脂粉；

pH6 .4的0 .01mol/L亚硫酸钠进行11S蛋白的提取，并透析除盐，冷冻干燥获得富硒黑豆11S蛋白；其中固液比1:15。

3.根据权利要求2所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述提取温度为室温或4℃。

4.根据权利要求1所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)为：壳聚糖和绿原酸在稀酸溶液中反应，反应完成后透析，过滤干燥。

5.根据权利要求4所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，壳聚糖和绿原酸的质量比为125:62～250:31；所述壳聚糖的浓度为0 .5～10wt％；所述稀酸为稀盐酸、过氧乙酸或乙酸的稀溶液；所述乙酸稀溶液的浓度为0 .5～2％；反应时间为12～48h；反应温度为室温；所述透析为12-14kDa透析膜透析48h；所述反应在过氧化氢和抗坏血酸的作用下进行。

6.根据权利要求5所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖和绿原酸的质量比为125:31；所述壳聚糖的浓度为5wt％；所述稀酸为乙酸的稀溶液；所述乙酸稀溶液的浓度为2％；所述反应时间为24h。

7.根据权利要求1所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中富硒黑豆11S蛋白、绿原酸接枝壳聚糖的质量比为5:1-1:3；富硒黑豆11S蛋白的浓度为2～8mg/mL；所述糖化反应为：75-95℃加热20-90min。

8.根据权利要求7所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中富硒黑豆11S蛋白、绿原酸接枝壳聚糖的质量比为3:1；富硒黑豆11S蛋白的浓度为6mg/mL；所述糖化反应为：90℃加热30min。

9.根据权利要求1所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，复合后体系调节pH为2-7；复合后经透析、离心、反溶液旋蒸、氮吹或喷雾干燥，分离纯化得到pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子。

10.根据权利要求9所述的一种pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的制备方法，其特征在于，复合后体系调节pH为3 .5。

11.权利要求1-10任一项所述的制备方法制备得到的pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子在制备药物载体中的应用，其特征在于，药物装载时，将待装载药物溶于乙醇中，再加入权利要求1-10任一项所述制备方法制备得到的pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子的溶液中，搅拌分散，分离，干燥，得到装载有药物的pH响应缓释的含硒蛋白复合纳米粒子；所述含硒蛋白复合纳米粒子和待装载药物的质量比为5:2～10:1；所述待装载药物包括姜黄素、人参皂苷、类胡萝卜素、紫杉醇。