[发明专利]一种体细胞胚胎途径的槲蕨种苗组培快繁方法有效
| 申请号: | 202010447206.4 | 申请日: | 2020-05-25 |
| 公开(公告)号: | CN111406651B | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
| 发明(设计)人: | 石雷;王頔 | 申请(专利权)人: | 中国科学院植物研究所 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙) 11498 | 代理人: | 王加岭;杨静 |
| 地址: | 100093 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 体细胞 胚胎 途径 种苗 组培快繁 方法 | ||
1.一种体细胞胚胎途径的槲蕨种苗组培快繁方法,包括如下步骤:外植体的获得;外植体预培养;外植体继代培养;体细胞胚胎分离和接种培养,其中,外植体的获得步骤包括:将槲蕨孢子无菌播种于孢子萌发培养基中,置于培养室,待孢子萌发并发育至配子体时期,在培养容器中添加无菌水,促进幼孢子体的形成,所述的孢子萌发培养基为添加3%蔗糖的1/2MS培养基;外植体预培养步骤包括:将幼孢子体叶片剪下接种至诱导体细胞胚的培养基,置于培养室预培养7天,所述的诱导体细胞胚的培养基为添加0.5-2mg/L 6-BA、3%蔗糖的1/2MS培养基;外植体继代培养步骤包括:将预培养7天的叶片外植体转接于含有3~5%蔗糖的1/2MS培养基中,置于培养室培养;体细胞胚胎分离和成苗培养步骤包括:将产生的体细胞胚从外植体上剥离,接种至1/2MS+3%蔗糖+0.3%AC 培养基,置于培养室培养。
2.如权利要求1所述的体细胞胚胎途径的槲蕨种苗组培快繁方法,其特征在于,所述的诱导体细胞胚的培养基为添加1mg/L 6-BA、3%蔗糖的1/2MS培养基。
3.如权利要求1或2所述的体细胞胚胎途径的槲蕨种苗组培快繁方法,其特征在于,叶片外植体面积为0.4~0.8cm2。
4.如权利要求1或2所述的体细胞胚胎途径的槲蕨种苗组培快繁方法,其特征在于,培养条件为:培养室温度为25±1℃,光照强度为50~60μmoL/(m2·s),光周期为16/8h,湿度为30%。
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