[发明专利]一种干酪乳杆菌及其在防治肾炎中的应用

说明书

本申请公开了一株干酪乳杆菌及其在防治肾炎中的应用。本申请经体外耐酸性试验和胆盐耐受性试验筛选出在肠道环境中生存能力较强的潜在益生菌干酪乳杆菌，并通过动物实验证实了其对急性肾缺血灌注损伤具有保护作用，减少炎症因子的分泌和纤维化程度；减缓肾脏慢性炎症的进程；促进肾小管的再生修复；减少肾缺血灌注慢性纤维化引起的肾脏细胞凋亡，对肾脏功能具有保护作用。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，特别涉及一种干酪乳杆菌及其在防治肾炎中的应用。

背景技术

肾炎是一种免疫性疾病是肾免疫介导的炎性反应，是不同的抗原微生物感染人体后，产生不同的抗体，结合成不同的免疫复合物，中国科学院肾病检测研究所认为沉积在肾脏的不同部位造成的病理损伤，形成不同的肾炎类型。肾炎是肾脏疾病中最常见的一种，其症状表现为乏力、腰部疼痛、肉眼血尿、水肿、高血压、肾功能异常及尿量减少等等。同时，在肾脏手术、肾移植和体外震波碎石等过程中，均可发生不同程度的再灌注损伤，它是急性肾衰最常见的原因。肾脏由于其血流高灌注的特性，缺血再灌注损伤发生率较高。

乳酸菌(Lactic acid bacteria，LAB)是一群革兰氏阳性、能发酵糖类产乳酸的细菌总称，其在自然界中广泛存在。其中的乳杆菌与人类生活关系密切，广泛应用于食品发酵，工业乳酸发酵及医疗保健领域中的有益微生物之一。乳杆菌是最重要的益生菌菌属，表现出极强的益生特性，如耐胃肠道消化液和胆盐，在胃肠液中定殖生长等等。同时，益生菌的干预可以增加肠道菌群中有益菌的含量，抗炎细菌的比例，提高机体免疫力。目前尚未发现对减缓肾脏慢性炎症的进程，促进肾脏损伤的修复，对肾脏功能具有保护作用的乳酸菌。

发明内容

本申请的目的之一在于提供一株干酪乳杆菌LC-10(Lactobacillus casei LC-10)。

本申请的目的之二在于提供干酪乳杆菌LC-10(Lactobacillus casei LC-10)在预防和辅助治疗肾脏炎症中的应用。

本申请的目的之三在于提供干酪乳杆菌LC-10在制备直投式发酵剂、发酵乳制品和益生菌固体饮料、片剂的功能性保健品中的应用。

本申请的目的是通过如下技术方案实现的：

本申请所述的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei LC-10)分离自锡林郭勒大草原自然发酵的酸马奶，具体地，是通过如下方法分离筛选得到的：

1.样品中的乳杆菌分离于自然发酵的酸马奶，分别吸取2mL所述酸马奶于灭菌小试管中并封口，1mL于装有灭菌CaCO₃粉的无菌采样瓶中(容积为2mL)，拧紧螺旋帽作为备用样品保藏在4℃冰箱内，尽快将乳酸菌进行分离；

2.将乳杆菌分离时，吸取1mL酸马奶样品接种于10mL灭菌石蕊牛乳培养基中，置于30-37℃恒温箱内增菌培养至酸化凝固，在培养基颜色变为粉红时将其取出，用灭菌接种环划线接种于含有10ppm放线菌酮和10ppm硫酸粘菌素的BL琼脂培养基上；

3.放入gaspak厌氧培养罐中，置于30-37℃条件下，培养48～72h。待菌落形成后，用接种环或接种针挑取菌落，接种于TPY液体中，置于30-37℃条件下，培养24～48h；

4.待菌株生长良好后，再次划线接种于BL琼脂培养基中培养(培养温度和时间同上)，仔细观察记录菌落形态和革兰氏染色细胞形态特征，并同时进行过氧化氢酶试验；