[发明专利]一种多重纳米-荧光定量超敏规模化检测试剂盒

权利要求书

1.一种检测猪蓝耳病病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒和猪细小病毒的纳米-荧光定量超敏规模化检测试剂盒，其特征在于：

所述试剂盒包括富集探针、放大标签、检测探针、检测引物，均为核酸片段，其中：

富集探针序列如SEQ ID NO:1、5、9、13、17所示；

放大标签序列如SEQ ID NO:2、6、10、14、18所示；

检测探针序列如SEQ ID NO:3、7、11、15、19所示，检测探针两端分别连接荧光基团和荧光淬灭基团；检测探针的5’端荧光基团为FAM，3’端的淬灭基团为MGB；

检测引物包括上游引物和下游引物，其中上游引物序列如SEQ ID NO:21所示，下游引物如SEQ ID NO:4、8、12、16、20所示；

所述富集探针被偶联于磁珠上；放大标签则被偶联于金纳米颗粒；

所述试剂盒还包括阳性对照核酸，序列如SEQ ID NO:22～26所示。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括病毒裂解液。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述病毒裂解液组成为：15mM Tris-HCl，1mM EDTA，10mM NaCl。

4.如权利要求1～3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PL核酸杂交缓冲液浓缩液，所述PL核酸杂交缓冲液浓缩液的组成为：0.75M NaCl，0.075M柠檬酸钠，0.1％Tween-20和2％SDS。

5.如权利要求1～3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括Taqman探针法荧光定量PCR反应液。

6.如权利要求1～3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括wash缓冲液浓缩液，所述wash缓冲液浓缩液是1M PBS。

7.如权利要求1～3任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括洗脱试剂浓缩液，所述洗脱试剂浓缩液组成为：5mol/L DTT，10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 7.5。

8.如SEQ ID NO .1～21所示的核酸在制备检测猪蓝耳病病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒和猪细小病毒的试剂盒中的用途，其特征在于：

所述试剂盒包括：富集探针、放大标签、检测探针、检测引物；

富集探针序列如SEQ ID NO:1、5、9、13、17所示；

放大标签序列如SEQ ID NO:2、6、10、14、18所示；

检测探针序列如SEQ ID NO:3、7、11、15、19所示，检测探针两端分别连接荧光基团和荧光淬灭基团；检测探针的5’端荧光基团为FAM，3’端的淬灭基团为MGB；

检测引物包括上游引物和下游引物，其中上游引物序列如SEQ ID NO:21所示，下游引物如SEQ ID NO:4、8、12、16、20所示；

所述富集探针被偶联于磁珠上；放大标签则被偶联于金纳米颗粒；

所述试剂盒还包括阳性对照核酸，序列如SEQ ID NO:22～26所示。