[发明专利]一种多糖及其制备方法和应用有效
申请号: | 202010400355.5 | 申请日: | 2020-05-13 |
公开(公告)号: | CN111620963B | 公开(公告)日: | 2021-07-20 |
发明(设计)人: | 丁侃;曾晖;厉飘飘 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海药物研究所 |
主分类号: | C08B37/06 | 分类号: | C08B37/06;A61K31/732;A61P25/28;A23L33/125 |
代理公司: | 北京金信知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 徐琳;严彩霞 |
地址: | 201203 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多糖 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种多糖RP02-1,其具有以下结构:
其中,a和b各自独立表示1,5-阿拉伯糖(1,5-Ara)的数目,且a+b=21;n为1-33的整数。
2.根据权利要求1所述的多糖RP02-1,其中,所述多糖RP02-1的重均分子量的范围为11-239kDa。
3.根据权利要求1或2所述的多糖RP02-1,其中,所述多糖RP02-1的单糖组成包括阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖和半乳糖醛酸,其中各单糖摩尔比为63.5:19.8:8.3:8.4。
4.一种从远志中提取权利要求1所述的多糖RP02-1的方法,包括以下步骤:
(1)多糖提取:将远志干药材用乙醇水溶液浸泡脱脂,脱脂后倾去乙醇干燥;用沸水提取,至硫酸-苯酚法检测无明显反应;经过离心、滤液浓缩、透析、再浓缩操作,加入1-20倍于浓缩液体积的乙醇水溶液,离心后得沉淀;所得沉淀再经无水乙醇与丙酮交替洗涤,最后干燥得远志粗多糖;
(2)多糖纯化:取远志粗多糖,加10-15倍重量的水溶解,离心,对上清液进行分级纯化,依次用H2O、0.05M NaCl、0.1M NaCl、0.2M NaCl洗脱,之后收集0.2M NaCl洗脱组分,浓缩,透析,干燥,得到初步纯化的多糖RP02;将所得的多糖RP02溶于0.2M NaCl中,离心,对上清液进行分离,再以0.2M NaCl洗脱,收集洗脱组分,进行浓缩、透析、干燥处理,得到多糖RP02-1。
5.一种从远志中提取权利要求1所述的多糖RP02-1的方法,包括以下步骤:
(1)多糖提取:将远志干药材用95%乙醇水溶液浸泡脱脂,脱脂后倾去乙醇干燥;用沸水提取,至硫酸-苯酚法检测无明显反应;经过离心、滤液浓缩、透析、再浓缩操作,加入5倍于浓缩液体积的95%乙醇水溶液,离心后得沉淀;所得沉淀再经无水乙醇与丙酮交替洗涤,最后干燥得远志粗多糖;
(2)多糖纯化:取远志粗多糖,加10-15倍重量的水溶解,离心,对上清液进行分级纯化,依次用H2O、0.05M NaCl、0.1M NaCl、0.2M NaCl洗脱,之后收集0.2M NaCl洗脱组分,浓缩,透析,干燥,得到初步纯化的多糖RP02;将所得的多糖RP02溶于0.2M NaCl中,离心,对上清液进行分离,再以0.2M NaCl洗脱,收集洗脱组分,进行浓缩、透析、干燥处理,得到多糖RP02-1。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其中:
所述步骤(1)中透析操作为将浓缩后的滤液置于透析袋中,用流动的自来水透析2-3天;和/或
所述步骤(1)中无水乙醇与丙酮交替洗涤后采用真空干燥,真空干燥的操作温度是40-60℃。
7.根据权利要求6所述的方法,其中,所述步骤(1)中用分子截留量为3,500Da的透析袋进行透析。
8.根据权利要求4或5所述的方法,其中:
所述步骤(2)中,洗脱速度是3-6mL/15min;和/或
所述步骤(2)中离心时间为10min,转速为4000r/min。
9.根据权利要求4或5所述的方法,其中,所述步骤(2)中的干燥为冷冻干燥,冷冻干燥处理的制冷温度为-50℃,后每小时升温5℃,最终温度为40℃,并持续干燥48h。
10.权利要求1-3中任一项所述的多糖RP02-1在制备用于抑制Aβ42的生成和聚集的药物中的用途。
11.权利要求1-3中任一项所述的多糖RP02-1在制备预防和/或治疗阿尔兹海默症的药物中的用途。
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