[发明专利]用于维生素A相关基因扩增的引物组、试剂盒及方法

说明书

本发明提供了用于维生素A相关基因扩增的引物组、试剂盒及方法，该引物组包括10个引物对，这10个引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.1‑20所示。利用该引物组扩增维生素A相关基因时，可通过单管一次反应同时对维生素A相关基因BCO1、RBP4、PKD1L2、PNPLA3和TTR进行扩增。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及用于维生素A相关基因扩增的引物组、试剂盒及方法。

背景技术

维生素A是儿童时期不可或缺的微量营养素，它不仅参与人体正常视觉的维持，而且在特异性及非特异性免疫、生长发育、细胞增殖分化、造血及调节代谢等方面发挥着广泛的调控作用。

基因缺陷导致维生素的吸收利用能力低下是出现维生素缺乏的重要原因，维生素的吸收利用能力低下可以由大量摄取所需维生素来代偿。而在不知道自身的维生素吸收利用能力低下的情况下，往往不能针对性补充需要的维生素，而反复出现维生素缺乏的症状。如光线昏暗的时候出现眼睛适应慢、嘴唇和皮肤容易干燥、手部长倒刺等不良特征，都可能是由于维生素缺乏导致的。长期处于维生素缺乏状态会导致不可逆的伤害或更严重疾病。

多重PCR(Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应)是在常规PCR基础上发展的一种新型扩增技术，即可在一个反应体系中加入两对及两对以上的引物，同时扩增多个核酸片段。多重PCR的检测通量高于常规PCR，因此，有必要提出用于扩增维生素A相关基因的引物组。

发明内容

本发明提供了用于维生素A相关基因扩增的引物组、试剂盒及方法，能够扩增维生素A相关基因。

为了达到上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：

详细地，维生素A相关基因有BCO1、RBP4、PKD1L2、PNPLA3、TTR，共可对应有15个多态性位点，这15个多态性位点可见下述表1。基于表1所示出的各个维生素A相关基因的相应多态性位点，来设计特异性扩增基因多态性位点区域的上下游引物。

表1

第一方面，本发明提供了用于维生素A相关基因扩增的引物组，包括下述10个引物对：第一引物对，用于扩增维生素A相关基因BCO1，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.1所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.2所示；第二引物对，用于扩增维生素A相关基因BCO1，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.3所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.4所示；第三引物对，用于扩增维生素A相关基因BCO1，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.5所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.6所示；第四引物对，用于扩增维生素A相关基因BCO1，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.7所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.8所示；第五引物对，用于扩增维生素A相关基因BCO1，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.9所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.10所示；第六引物对，用于扩增维生素A相关基因RBP4，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.11所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ IDNO.12所示；第七引物对，用于扩增维生素A相关基因RBP4，上游引物的核苷酸序列由SEQ IDNO.13所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.14所示；第八引物对，用于扩增维生素A相关基因PKD1L2，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.15所示，下游引物的核苷酸序列由SEQID NO.16所示；第九引物对，用于扩增维生素A相关基因PNPLA3，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.17所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.18所示；第十引物对，用于扩增维生素A相关基因TTR，上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.19所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.20所示。