[发明专利]一种基于谷胱甘肽金纳米簇的荧光植酸检测方法

说明书

本发明提供了一种基于谷胱甘肽金纳米簇的荧光传感器及其应用，以谷胱甘肽同时作为还原剂和稳定剂，采用化学还原法制备谷胱甘肽金纳米簇（GSH‑AuNCs），合成的金纳米簇粒径小、分散性好，在360 nm的激发波长下，其在581 nm处具有最大荧光发射峰，当GSH‑AuNCs溶液中存在Pbsupgt;2+/supgt;时,Pbsupgt;2+/supgt;可通过与金纳米簇上的谷胱甘肽发生相互作用形成聚集体而使得体系荧光增强。向GSH‑AuNCs‑Pbsupgt;2+/supgt;复合体系中加入植酸后，由于植酸与Pbsupgt;2+/supgt;的配位作用，Pbsupgt;2+/supgt;脱离金纳米簇，荧光强度开始下降。基于此，构建了一种快速检测植酸的荧光传感方法，该方法响应迅速、操作简单、选择性较高，具有较好的发展潜力。

技术领域

本发明涉及一种快速检测植酸的方法，具体是一种基于谷胱甘肽金纳米簇的荧光植酸检测方法。

背景技术

植酸(Phytic acid, PA)，又称为肌醇六磷酸，是一种简单的环状碳水化合物，每个碳原子上带有六个磷酸基团。植酸可作为食品中的防腐剂，在降低血清胆固醇和甘油三酸酯含量以及预防结肠癌风险等方面也具有非常有益的作用。但当其过量摄入时，植酸可以与某些必需的矿质元素结合形成植酸盐，导致矿物质的生物利用度下降进而引起人类和动物体内的矿物质缺乏。因而，开发一些有效检测植酸的方法具有重要意义。目前，已经有很多针对植酸的检测方法包括高效液相色谱法、高效离子色谱法、核磁共振法、电感耦合等离子体原子发射光谱法、分光光度法以及火焰原子吸收法等。这些分析手段各有优缺点，虽然检测灵敏度高、稳定性好，但由于其操作繁琐、耗时长、需要较大的成本以及专业的技术人员等使其应用受到了一定的限制。随着荧光纳米材料的引入，荧光光谱分析法得到了更大的发展。金纳米簇作为荧光纳米材料的典型代表，具有合成简便、尺寸超微、荧光性好以及稳定性强等优良特性而获得了广泛的关注。采用模板法合成金纳米簇，通过研究目标物加入前后体系金纳米簇所发射的荧光强度与目标物浓度之间的关系，可实现对物质的定量检测。这种方法相比较于传统的检测手段，操作更为简单、时效性强、选择性好，具有潜在的应用价值。

发明内容

本发明旨在针对现有技术的不足，提供一种基于谷胱甘肽金纳米簇的荧光植酸检测方法，以解决现有技术中用于针对植酸的常规检测方法操作不便、灵敏度低等缺陷问题。

为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

一种基于谷胱甘肽金纳米簇的荧光植酸检测方法，包括以下步骤：

S1.谷胱甘肽金纳米簇GSH-AuNCs的制备

将新鲜配制的2.50 mL浓度为20 mM 的HAuCl₄水溶液和0.75 mL浓度为100 mM 的GSH水溶液与21.75 mL的超纯水在25℃下混合5 min；再将反应混合液移至70℃的恒温加热磁力搅拌器中反应，温和搅拌24 h，得到在日光灯下为淡黄色、紫外灯下发出强橙色荧光的GSH-AuNCs水溶液；制备过程所用的玻璃仪器均用铬酸洗液浸泡过夜，随后用超纯水进行充分洗涤，置于烘箱中干燥后使用；

S2.荧光检测植酸

将2 mL经Tris-HCl缓冲液稀释50倍后的GSH-AuNCs溶液与Pb²⁺混合，充分反应1min后，再向混合溶液中加入不同浓度的植酸溶液，孵化3 min，待反应完全后，以360 nm为激发波长，激发和发射狭缝分别为5 nm和10 nm，测定475 nm ~700 nm范围内该孵化溶液的荧光发射光谱；随后以植酸浓度为横坐标，体系相对荧光值F/F_A为纵坐标，绘制工作曲线，线性拟合得到一个一元一次方程；采用同样的方法测定经提取、净化预处理后的奶粉和糯米样品中植酸含量，并通过标准加入法，向样品中加入不同水平的植酸标准溶液，并测定样品的加标回收率。

步骤S2中所述的Pb²⁺浓度为35 μM。