[发明专利]一种提取硫酸软骨素的方法、硫酸软骨素及其应用

说明书

本发明属于硫酸软骨素提取技术领域，公开了一种提取硫酸软骨素的方法、硫酸软骨素及其应用，将鱼头软骨粉碎至颗粒状并晾干除去多余的水分作为蒸汽爆破原料，将部分软骨放于冻干机中冻干作为优化酶解工艺的原料并得到最优酶解工艺；干基汽爆鱼骨按照1：60料液比加入蒸馏水后加入1.2％的复合中性蛋白酶在55℃酶解4.5h；将酶解液放于90℃水浴10min后5000r/min离心10min，取上清液抽滤过滤纸和0.45μm滤膜除去大分子杂质，使用10kDa超滤膜重复循环分离6次得到硫酸软骨素和胶原蛋白肽，将所得溶液旋转蒸发除去多余的水分，再冻干得到产品。本发明是绿色无污染工艺，完全没有引入酸碱盐和使用乙醇，降低了生产成本。

技术领域

本发明属于硫酸软骨素提取技术领域，尤其涉及一种提取硫酸软骨素的方法、硫酸软骨素及其应用。

背景技术

目前硫酸软骨素生产的方法主要有三种：盐解法、碱解法和酶解法，国内使用较多的方法是采用稀碱或浓碱与酶解相结合的方法来提取硫酸软骨素，传统工艺是：软骨蒸煮→碱提取→酶水解→双氧水脱色→酒精沉淀→精制→硫酸软骨素成品，采用这种碱法酶解生产工艺存在步骤繁琐、周期较长，一般需要3-5天，产品质量和收率不稳定，在高温蒸煮、碱提取、酶解和脱色过程中，硫酸软骨素受到严重破坏，产品收率偏低、溶液颜色加深、乙醇耗量大、破坏环境和生产成本高、产生大量的盐需要除盐，延长了生产时间造成了环境污染。因此我们需要改进传统工艺生产，避免环境污染、降低生产成本、减少资源浪费、提高生产效率，实现绿色环保经济便捷的生产。

根据以上对现有技术的分析，存在的问题及缺陷为：

(1)传统工艺提取硫酸软骨素的方法存在加入酸碱试剂造成环境污染。

(2)传统工艺提取硫酸软骨素的方法存在生产工艺中醇沉的工艺使用大量高纯度的乙醇增加生产成本资源浪费。

解决以上问题及缺陷的难度为：酶解的目的是将蛋白质变为多肽将硫酸软骨素暴露出来，但是由于硫酸软骨素是一种糖胺聚糖，多糖与蛋白通过O-糖苷键与蛋白相连而蛋白酶很难断裂这种糖苷键，因此加入稀碱有利于糖苷键的断裂，而不引入碱液对硫酸软骨素的纯度影响很大；利用硫酸软骨素不溶于乙醇的原理来纯化硫酸软骨素避免了引入小分子多肽，有利于提高硫酸软骨素纯度。

解决以上问题及缺陷的意义为：避免引入酸碱盐，有利于保护环境绿色生产；不采用醇沉工艺可以降低生产成本，减少生产时间提高生产效率。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种提取硫酸软骨素的方法、硫酸软骨素及其应用。

本发明是这样实现的，一种提取硫酸软骨素的方法，所述提取硫酸软骨素的方法包括：

第一步，将鱼头软骨粉碎至颗粒状并晾干除去多余的水分作为蒸汽爆破原料，将部分软骨放于冻干机中冻干作为酶解的原料；

第二步，干基鱼骨按照1：60料液比加入蒸馏水后加入1.2％的复合中性蛋白酶在55℃酶解4.5h。；

第三步，将酶解液放于90℃水浴10min后5000r/min离心10min，取上清液抽滤过滤纸和0.45μm滤膜除去大分子杂质，使用10kDa超滤膜重复循环分离6次得到硫酸软骨素和胶原蛋白肽，将所得溶液旋转蒸发除去多余的水分，再冻干得到产品。

进一步，所述第一步取鲟鱼的加工下脚料-鱼头，放入到水中，沸水加热10min，用水将鱼头多余的部分洗去得到头骨，将鱼头软骨粉碎至颗粒状并晾干除去多余的水分作为蒸汽爆破原料，将部分软骨放于冻干机中冻干作为酶解参数优化的原料。

进一步，所述提取硫酸软骨素的酶解工艺：料液比：1：60；酶添加量：1.2％(干基鱼骨)；酶解温度：55℃；酶解时间：4.5h。通过优化酶解条件达到最大水解度可以尽可能降低多肽的分子量，一方面有利于硫酸软骨素与胶原蛋白肽的分离，另一方面有利于增加小分子胶原蛋白肽的产量提高多肽的品质。