[发明专利]发酵乳杆菌发酵人参的方法及人参发酵产物和用途

权利要求书

1.一种发酵乳杆菌发酵人参的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将人参粉碎过药典筛四号筛，得到人参粉末；将人参粉末与去离子水混悬后制备为人参匀浆，用高压蒸汽法进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为8wt％；其中，所述发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentium)购自北京豫维科技有限公司，保藏编号为：CICC 22808；

(2)上述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，发酵乳杆菌种子液的活菌数为5×10⁷CFU·mL^-1，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的3wt％，在28℃下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为36h，得到人参发酵产物；

将人参发酵产物的匀浆冷冻干燥处理，取冷冻干燥后粉末0.30g，置于具塞三角瓶中，加80％甲醇25mL，密塞后称定重量，摇匀，在250W和50kHz的条件下超声提取1h，离心收集上清，沉淀以相同条件提取两次，分别收集上清；上清挥干后，分别用100％甲醇溶解并定容至10ml，溶液过0.45μm微孔滤膜，得到人参发酵清液；

采用如下色谱条件进行HPLC分析的结果如图3所示：

安捷伦Eclipse XDB-C18色谱柱柱，尺寸为4.6mm×250mm，粒度为5μm；流动相：乙腈-0.05mol·L^-1磷酸二氢钾水溶液，洗脱梯度为：0-10min，20％乙腈；10-22min，20％乙腈-22％乙腈；22-30min，22％乙腈-29％乙腈；30-50min，29％乙腈-29％乙腈；50-60min，29％乙腈-35％乙腈；60-65min，35％乙腈-40％乙腈；65-75min，40％乙腈-30％乙腈；75-85min，30％乙腈-20％乙腈；85-90min，20％乙腈-80％A乙腈；流速：1mL·min^-1；柱温：30℃；检测波长：203nm；进样量：10μL；分析时间：90min。