[发明专利]一株优化的高产岩藻糖基乳糖的酿酒酵母菌株及其应用有效
| 申请号： | 202010187632.9 | 申请日： | 2020-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN111471606B | 公开（公告）日： | 2022-03-08 |
| 发明（设计）人： | 刘巍峰;孟祥锋;徐明远 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N9/12;C12N9/88;C12N9/04;C12N9/10;C12N9/90;C12P19/12;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人： | 范盈 |
| 地址： | 266237 山东省青岛市即墨区鳌*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 优化 高产 岩藻糖基 乳糖 酿酒 酵母 菌株 及其 应用 | ||
1.一株高产2’-岩藻糖基乳糖的酿酒酵母工程菌株，其特征在于，
所述酿酒酵母工程菌株中含有目的基因，所述目的基因为重组的乳糖透性酶(Lactosepermease)、重组的GDP-甘露糖脱水酶(GDP-mannose-4,6-dehydratase)、重组的GDP-岩藻糖合酶(GDP-L-fucose synthase)、重组的α-1,2-岩藻糖基转移酶(α-1,2fucosyltransferase)、重组的甘露糖磷酸异构酶(Phosphomannomutase)和重组的GDP-甘露糖焦磷酸酶(GDP-mannose pyrophosphorylase)；
所述α-1,2-岩藻糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID No.11所示；
所述乳糖透性酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
所述GDP-甘露糖脱水酶的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；
所述GDP-岩藻糖合酶的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示；
所述甘露糖磷酸异构酶的氨基酸序列如SEQ ID No.19所示；
所述GDP-甘露糖焦磷酸酶的氨基酸序列如SEQ ID No.21所示。
2.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌株，其特征在于，所述目的基因还包含重组的甘露糖-6-磷酸异构酶(Mannose-6-phosphate isomerase)，所述甘露糖-6-磷酸异构酶来源于酿酒酵母。
3.根据权利要求2所述的酿酒酵母工程菌株，其特征在于，所述目的基因还包含重组的无线粒体信号肽的NADH激酶(NADHkinase)，所述NADH激酶来源于酿酒酵母。
4.根据权利要求2所述的酿酒酵母工程菌株，其特征在于，所述甘露糖-6-磷酸异构酶的氨基酸序列如SEQ ID No.23所示。
5.根据权利要求3所述的酿酒酵母工程菌株，其特征在于，所述NADH激酶的氨基酸序列如SEQ ID No.25所示。
6.根据权利要求1-5任一所述的酿酒酵母工程菌株，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌株的出发菌株为酿酒酵母W303-1a。
7.权利要求1-6任一所述的酿酒酵母工程菌株的制备方法，其特征在于，所述方法包括将所述目的基因重组到酿酒酵母中的步骤。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法包括将所述目的基因整合到酿酒酵母的基因组中的步骤。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述目的基因的整合位点包括TRP1、URA3、LEU2或HIS3。
10.权利要求1-6任一所述的酿酒酵母工程菌株在生产2’-岩藻糖基乳糖中的应用。
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