[发明专利]氯丙那林半抗原和人工抗原及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了氯丙那林半抗原和人工抗原及其制备方法与应用，该氯丙那林半抗原的结构式为和中的一种，该氯丙那林人工抗原由上述氯丙那林半抗原与载体蛋白偶联后得到。利用该氯丙那林人工抗原免疫动物，可得到效价高，灵敏度高的特异性抗体，本发明所提供的氯丙那林半抗原及其制备的抗体，为建立快速、简便、价廉、灵敏、特异的氯丙那林药物检测方法提供了新手段；利用本发明提供的半抗原与载体蛋白的偶联物制备氯丙那林抗体，制备过程简单、经济，抗体的检测灵敏度高、实用价值高。本发明在兽药残留检测中具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及免疫检测领域，具体涉及氯丙那林半抗原和人工抗原 及其制备方法与应用。

背景技术

氯丙那林(Clorprenaline，CLP)属于选择性β2-受体激动剂类药物， 因其具有明显的支气管扩张作用，可用于治疗支气管炎、喘息性支气 管炎等，故又名氯喘，化学名为1-(2-氯苯基)-2-异丙基氨基-乙醇， 其硫酸盐为白色或类白色结晶性粉末。

氯丙那林在动物体内代谢缓慢且具有蓄积毒性，通过食物链的传 递易对人类的健康造成危害。

除了从源头上控制氯丙那林的使用外，对动物源食品中药物的残 留进行检测及监控，也是保障食品安全的重要措施，因此，有必要建 立简便、快速、灵敏的残留检测方法。

目前，氯丙那林残留的检测方法主要是液相色谱(HPLC)或色谱 -质谱联用(LC-MS)等理化分析方法，而这些方法均需要昂贵的仪器、 复杂的样品前处理和专业人员操作，繁琐费时、检测成本较高，且不 能现场操作，不适于大批量样本的快速筛查。

以抗原和抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的免疫分析技术， 以其速度快、成本低、灵敏度高等优点，目前被广泛用于食源性样本 中药物残留的快速筛选。因此，通过氯丙那林半抗原和人工抗原制备 性能优异的抗体是非常有必要的。

发明内容

本发明的目的是提供氯丙那林半抗原和人工抗原及其制备方法与 应用。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明一方面提供了氯丙那林半抗原，其结构式为如下式(I)、 式(II)和式(III)中的一种：

本发明另一方面提供了上述氯丙那林半抗原的制备方法，包括以 下步骤：

S1、2-氯苯甲醛发生加成环化反应制备化合物2；

S2、化合物2与邻苯二甲酸亚胺反应得到化合物4；

S3、化合物4反应制备化合物5；

S4、化合物5和化合物6反应得到化合物7；

S5、化合物7发生酯基水解反应得到所述氯丙那林半抗原。

其中：

所述化合物2、化合物4和化合物5的结构式分别如下：

所述化合物6的结构式为

中的一种；

所述化合物7的结构式为

中的一种。

进一步地，在上述技术方案中，上述氯丙那林半抗原的制备方法， 具体包括以下步骤：

S1、将碘化三甲基磺铵溶于二甲基亚砜和四氢呋喃的混合物中， 加入NaH后室温搅拌，再将2-氯苯甲醛逐滴加入后室温搅拌，加水后 用乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和NaCl水溶液冲洗后，再用无水 Na₂SO4脱水，并在减压条件下将溶剂完全蒸发得到化合物2；