[发明专利]氟吡甲禾灵半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 202010145334.3 | 申请日: | 2020-03-05 |
| 公开(公告)号: | CN111333570B | 公开(公告)日: | 2022-09-23 |
| 发明(设计)人: | 崔廷婷;朱亮亮;万宇平;杜玲;刘玉梅;张彩丽;郭春梅 | 申请(专利权)人: | 北京望尔生物技术有限公司;北京勤邦生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C07D213/643 | 分类号: | C07D213/643;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K16/44;G01N33/53 |
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| 地址: | 102206 北京市昌*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 氟吡甲禾灵 半抗原 人工 抗原 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种氟吡甲禾灵半抗原,其特征在于,其具有如下结构式:
2.如权利要求1所述的氟吡甲禾灵半抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)在碱性条件下,使2-(4-羟基苯氧基)丙酸甲酯与[2-氯-5-(三氟甲基)吡啶]甲醇发生反应,得到中间体1,所述中间体1具有结构式
2)将所述中间体1与琥珀酸酐发生反应,得到氟吡甲禾灵半抗原。
3.如权利要求2所述的氟吡甲禾灵半抗原的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中,所述碱性条件由氢化钠提供,所述2-(4-羟基苯氧基)丙酸甲酯、[2-氯-5-(三氟甲基)吡啶]甲醇、氢化钠的物质的量之比为1:1.1:2;
所述反应在溶剂中进行,所述溶剂为二甲基亚砜;
所述反应条件为:油浴加热80℃反应6h;
所述步骤1)反应结束后,还包括对反应体系进行后处理的步骤,具体如下:将反应体系冷却到室温,加入水,加乙酸乙酯萃取3次,合并有机相,无水硫酸钠干燥,蒸干,用乙腈和正己烷体积比为1:10的混合溶剂重结晶获得中间体1。
4.如权利要求2所述的氟吡甲禾灵半抗原的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中,所述中间体1、琥珀酸酐的物质的量之比为1:1;
所述反应在溶剂中进行,所述溶剂为吡啶;
所述反应条件为:油浴加热65℃反应4h;
所述步骤2)反应结束后,还包括对反应体系进行后处理的步骤,具体如下:将反应体系旋蒸除去吡啶,用硅胶柱纯化,然后用乙酸乙酯和石油醚体积比为1:3的混合溶剂洗脱分离获得氟吡甲禾灵半抗原。
5.一种氟吡甲禾灵人工抗原,其特征在于,其是载体蛋白和权利要求1所述的氟吡甲禾灵半抗原偶联得到的偶联物。
6.如权利要求5所述的氟吡甲禾灵人工抗原,其特征在于,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白或血蓝蛋白。
7.如权利要求5或6所述的氟吡甲禾灵人工抗原的制备方法,其特征在于,采用碳二亚胺法将载体蛋白偶联于权利要求1所述氟吡甲禾灵半抗原的羧基上。
8.一种氟吡甲禾灵抗体,其特征在于,它是由权利要求5所述的氟吡甲禾灵人工抗原经动物免疫得到,其能与氟吡甲禾灵发生特异性免疫反应。
9.一种权利要求8所述的氟吡甲禾灵抗体在检测氟吡甲禾灵残留中的应用。
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