[发明专利]一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离方法在审
申请号: | 202010104037.4 | 申请日: | 2020-02-20 |
公开(公告)号: | CN111117774A | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
发明(设计)人: | 李娜;龙静泓;盛明 | 申请(专利权)人: | 中国科学院东北地理与农业生态研究所 |
主分类号: | C11C1/00 | 分类号: | C11C1/00 |
代理公司: | 哈尔滨市文洋专利代理事务所(普通合伙) 23210 | 代理人: | 何强 |
地址: | 130000 吉林省长春市高新*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 土壤 微生物 磷脂 脂肪酸 固液相 高效 分离 方法 | ||
1.一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离方法,其特征在于一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离方法按照以下步骤进行:
一、配制Blight-Dyer提取液:
将氯仿、甲醇和柠檬酸按照1:2:0.8的体积比混合,即得Blight-Dyer提取液;
二、将3g冷冻干燥土样加入到带盖玻璃试管(1)中,加入1.5ml柠檬酸钠缓冲液、3.8ml甲醇、1.9ml氯仿和2ml Blight-Dyer提取液,盖上玻璃盖(5),得混合液,所述柠檬酸钠缓冲液浓度为0.15mol/L,pH值为4;
三、将步骤二的混合液涡旋2min,静止2h,以3000rpm离心10min,用长嘴胶头吸管(2)吸取上清液转移到另一个带盖玻璃试管(1)中,沉淀;
四、向沉淀后的滤渣内,加入1.5ml柠檬酸钠缓冲液、3.8ml甲醇、1.9ml氯仿和2mlBlight-Dyer提取液,盖上玻璃盖(5),得混合液,所述柠檬酸钠缓冲液浓度为0.15mol/L,pH值为4;
混合液涡旋2min,静止2h,以3000rpm离心10min,用长嘴胶头吸管(2)吸取上清液转移到另一个带盖玻璃试管(1)中,沉淀;
五、重复步骤四2次,收集所有上清液并合并,即完成土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离。
2.根据权利要求1所述一种土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分离方法,其特征在于步骤三中所述用长嘴胶头吸管(2)吸液方法如下:
在长嘴胶头吸管(2)的细长嘴进入带盖玻璃试管(1)前,用力挤吸管的胶头(3),排净长嘴胶头吸管(2)内的空气,将长嘴胶头吸管(2)不触碰带盖玻璃试管(1)的内壁匀速进入带盖玻璃试管(1)内,待长嘴胶头吸管(2)的细长嘴到达并进入上清液后,再慢慢放开长嘴胶头吸管(2)的胶头(3),上清液便慢慢被吸入长嘴吸管内。
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