[发明专利]一种利用套装制备血小板生长因子浓集物的方法

说明书

本发明提供了一种利用套装制备血小板生长因子浓集物的方法，属于再生医学技术领域。本发明将抗凝全血静置30～60min后，再利用富血小板血浆制备用套装对静置后的抗凝全血进行离心，有利于提高产物的纯度和得率；本发明在离心后保留富血小板血浆层(PPP层)和贫血小板血浆层(PRP层)进行冻融，能够最大化的得到生长因子。本发明的制备方法制备得到的血小板生长因子浓集物(GF‑PL)含有高浓度的各类生长因子，包括PDGF、TGF‑β、IGF‑1、EGF、FGF和VEGF，各因子浓度显著高于常规血小板套装制备的产物(PRP)和常规血小板裂解液制备的产物，差异结果均具有统计学意义。

技术领域

本发明涉及再生医学技术领域，尤其涉及一种利用套装制备血小板生长因子浓集物的方法。

背景技术

富血小板血浆(Platelet-rich plasma，PRP)是自体抗凝全血经离心后得到的血小板浓缩物。PRP通过释放各种生长因子(PDGF、IGF-1、EGF、FGF、TGF-beta、VEGF等)，促进组织再生修复，包括关节软骨的修复。PRP中生长因子的含量越高，越有利于组织的再生修复。目前缺少一种含有高浓度生长因子的血小板浓缩物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用套装制备血小板生长因子浓集物的方法，本发明的血小板生长因子浓集物中生长因子含量高，有利于组织的再生修复。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种利用套装制备血小板生长因子浓集物的方法，包括以下步骤：

1)将抗凝全血静置30～60min，利用富血小板血浆制备用套装对静置后的抗凝全血进行离心，收集富血小板血浆层和贫血小板血浆层的产物，得到离心产物；

2)对所述离心产物进行3～6次冻融，得到冻融产物；

3)将所述冻融产物进行离心，收集上清液，得到血小板生长因子浓集物。

优选的，步骤2)中所述冻融的次数为4～5次。

优选的，步骤2)中所述冻融的方式包括液氮冻融。

优选的，步骤2)中每次冻融过程中将所述离心产物于-20～-196℃条件下冷冻5～10min后，于4～37℃的条件下融解5～10min。

优选的，步骤2)中所述冷冻的温度为-30～-80℃。

优选的，所述融解的过程中伴随超声或震荡处理。

优选的，步骤3)中所述离心的转速为3000～10000rpm，时间为5～10min，温度为0～4℃。

本发明还提供了上述方案所述方法制备得到的血小板生长因子浓集物。

本发明还提供了上述方案所述血小板生长因子浓集物在制备组织再生修复的药物中的应用。

优选的，所述组织再生修复包括关节软骨修复、皮肤损伤修复和压疮损伤修复。

本发明的有益效果：本发明提供了一种利用套装制备血小板生长因子浓集物的方法，本发明将抗凝全血静置30～60min后，再利用富血小板血浆制备用套装对静置后的抗凝全血进行离心，有利于提高产物的纯度和得率；本发明在离心后保留富血小板血浆层(PRP，中层)和贫血小板血浆层(PPP，上层)进行冻融，能够最大化的得到生长因子。本发明的制备方法制备得到的血小板生长因子浓集物(GF-PL)含有高浓度的各类生长因子，包括PDGF、TGF-β、IGF-1、EGF、FGF和VEGF，各因子浓度显著高于常规血小板套装制备的产物(PRP)和常规血小板裂解液制备的产物，差异结果均具有统计学意义。

附图说明