[发明专利]一组具有抗病毒活性的肽类化合物奥米克欣及其应用有效
申请号: | 202010097607.1 | 申请日: | 2020-02-17 |
公开(公告)号: | CN113262293B | 公开(公告)日: | 2022-11-08 |
发明(设计)人: | 司书毅;洪斌;李玉环;孙红敏;蒋建东;李星星;陈明华;高荣梅;车永胜;甄心;余利岩;刘红宇;钟鸣;李妍;巫晔翔;侍媛媛 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
主分类号: | A61K38/05 | 分类号: | A61K38/05;A61P11/00;A61P31/14;A61P31/16;C12P21/02;C07K5/068;C07K5/078;C07K1/20;C12N9/00;C12N15/52;C12R1/465 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 范盈 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一组 具有 抗病毒 活性 化合物 奥米克欣 及其 应用 | ||
1.一组肽类化合物,其特征在于,所述的肽类化合物为奥米克欣B1、奥米克欣B2、奥米克欣B3、奥米克欣B5、奥米克欣B6,其结构如式(1)所示,
各个化合物的R1~R4的取代基分别如下表所示:
2.权利要求1所述的肽类化合物的制备方法,所述方法包括如下步骤,
(1)链霉菌(Streptomyces sp.)CPCC 200451的发酵液,4000rpm,15min离心后收取上清液;
(2)采用大孔吸附树脂级联反相C18层析柱HPLC法收集活性组分;
(3)将步骤(2)获得的活性组分,经半制备RP-HPLC分离,即得所述肽类化合物奥米克欣;
步骤(1)所述的发酵液为:
以10%的接种量转种于A3发酵培养基中,在28℃、200rpm下培养3~12d后,收集发酵液;
所述A3发酵培养基各成分含量为:甘油20g/L,糊精20g/L,蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,硫酸铵2g/L,碳酸钙2g/L;pH 7.2-7.4。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,
步骤(2)的大孔吸附树脂级联反相HPLC法的步骤参数为:
使用HP20大孔吸附树脂和C18反相HPLC层析柱,
分离步骤为:
1)上清液经大孔吸附树脂HP20进行吸附后,使用两倍柱体积的去离子水冲洗;
2)采用乙醇-水进行梯度洗脱,20%、50%和100%乙醇依次洗脱,每个梯度洗脱至流出液无颜色或颜色不变,收集50%乙醇梯度的洗脱液,经过减压浓缩后备用;
3)步骤2)得到的50%乙醇梯度的洗脱液浓缩后进行C18柱,以乙腈-水梯度洗脱,10%、12%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、80%和100%乙腈依次洗脱,收集15%~80%的梯度洗脱液;
步骤(3)所述的半制备RP-HPLC参数及方法为:色谱柱:SHISEIDO Capcell-Pak PFP5μm,10×250mm;流动相依次分别为:
20%ACN/含0.1%HCOOH的H2O收集奥米克欣B系列化合物;
流速:1.5mL/min。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,以乙腈-水梯度洗脱时,收集15%~20%乙腈-水洗脱液。
5.权利要求1所述的肽类化合物在制备抗病毒的药物中的应用,所述病毒为流感病毒、冠状病毒。
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