[发明专利]一种PCR扩增产物的检测方法在审
申请号: | 202010084187.3 | 申请日: | 2020-02-10 |
公开(公告)号: | CN111254189A | 公开(公告)日: | 2020-06-09 |
发明(设计)人: | 徐世永;陈清;刘京鸽;茅慧华;李斯旋;崔凛;徐嘉雯 | 申请(专利权)人: | 金陵科技学院 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 胡建华 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 pcr 扩增 产物 检测 方法 | ||
1.一种PCR扩增产物的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)在PCR反应体系中添加荧光染料和非离子去污剂,然后进行PCR扩增;
其中,所述荧光染料在PCR反应体系中的浓度为0.1×-1×,所述非离子去污剂在PCR反应体系中的体积浓度为0.1%-0.5%;
(2)将步骤(1)得到的体系在紫外灯照射下于暗场肉眼观察或经荧光成像系统照相后观察,通过体系颜色判断PCR扩增产物的有无。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)中所述荧光染料为SYBRGreen I、溴化乙锭、Goldview、Gelred、4S Red Plus、4S Green Plus和Genegreen中的任意一种或几种的组合。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)中所述非离子去污剂为TrionX-100、Tween-20、嵌段式聚醚F-127、聚环氧乙烯月桂酰醚和NP-40中的任意一种或几种的组合。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述非离子去污剂为NP-40。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)中所述荧光染料在反应体系中的浓度为0.2×-0.6×,所述非离子去污剂在反应体系中的体积浓度为0.1%-0.3%。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)中所述PCR反应体系包括TaqDNA聚合酶、DNA模板、引物、dNTP和含Mg2+的反应缓冲液。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述DNA模板为公鸽或母鸽的DNA。
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