[发明专利]用于检测西瓜白粉病抗性的SNP位点、KASP标记及其应用

权利要求书

1.一种用于检测西瓜白粉病抗性的KASP引物组合，其特征在于，所述引物组合由两条上游引物和一条下游引物组成，其核苷酸序列分别如序列表中序列3-5所示；所述序列3的5’末端连接荧光基团HEX；所述序列4的5’末端连接荧光基团FAM。

2.一种用于检测西瓜白粉病抗性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的用于检测西瓜白粉病抗性的KASP引物组合。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述用于检测西瓜白粉病抗性的试剂盒还包括高保真Taq酶和dNTP。

4.权利要求1所述的用于检测西瓜白粉病抗性的KASP引物组合，或者权利要求2或3所述的用于检测西瓜白粉病抗性的试剂盒在如下任一种中的应用：

1）检测或者辅助检测西瓜白粉病抗性基因LOX基因的基因型；

2）培育具有西瓜白粉病抗性的新品种西瓜。

5.一种检测或者辅助检测西瓜白粉病抗性基因LOX基因的基因型的方法，其特征在于，包括如下步骤：

以待测西瓜的基因组DNA为模板，采用权利要求1所述的用于检测西瓜白粉病抗性的KASP引物组合，或者权利要求2或3所述的用于检测西瓜白粉病抗性的试剂盒进行PCR扩增，将所得扩增产物进行荧光信号扫描；

若荧光信号为深红色，则待测西瓜的LOX基因为纯合TT基因型；

若荧光信号为蓝色，则待测西瓜的LOX基因为纯合GG基因型；

若荧光信号为绿色，则待测西瓜的LOX基因为TG基因型。

6.一种培育具有西瓜白粉病抗性的新品种的方法，其特征在于，包括如下步骤：

以感白粉病、品质优良材料为受体亲本P1，与具有抗白粉病基因、品质一般的供体亲本P2配制F₁代杂交组合；再以受体亲本P1作为轮回亲本进行回交，获得BC₁F₁代回交分离群体；

对所述BC₁F₁代回交分离群体，采用权利要求1所述的用于检测西瓜白粉病抗性的KASP标记的引物序列组合，或者权利要求2或3所述的用于检测西瓜白粉病抗性的试剂盒进行基因型检测，选取SNP分型为TG基因型的单株继续回交，获得BC₂F₁代回交分离群体；

对所述BC₂F₁代回交分离群体，采用权利要求1所述的用于检测西瓜白粉病抗性的KASP标记的引物序列组合，或者权利要求2或3所述的用于检测西瓜白粉病抗性的试剂盒进行基因型检测，选取SNP分型为TG基因型的单株，继续回交至BC₄代，获得BC₄F₁代回交分离群体；

对BC₄F₁代回交分离群体进一步进行了自交，继续采用权利要求1所述的用于检测西瓜白粉病抗性的KASP标记的引物序列组合，或者权利要求2或3所述的用于检测西瓜白粉病抗性的试剂盒进行基因型检测，选取SNP分型为TT基因型的单株自交，获得纯合抗白粉病株系。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述受体亲本P1为感白粉病的小富母本，所述供体亲本P2为抗白粉病的Lvwangtuo。