[发明专利]一种靶向热休克蛋白60的亲和多肽及其筛选方法与用途

说明书

本发明涉及一种靶向热休克蛋白60的亲和多肽及其筛选方法与用途，所述多肽如以下通式所示：CX₁X₂X₃X₄SX₅X₆C。其可以特异性靶向HSP60，尤其是基于HSP60在大多数肿瘤中高表达的特点，进而为高效靶向识别肿瘤组织，预测和提高肿瘤靶向治疗提供新的可能性；本发明提供了一种有效筛选HSP60靶向结合多肽的方法，特点为选高通量，效率高，筛选出的亲和多肽，分子量小、特异性强、稳定性好；本发明还涉及了该多肽作为多肽分子探针、多肽制剂、肿瘤导向多肽或显影剂的药物组合及其用途。本发明所述多肽能对HSP60具有特异性靶向作用，对肿瘤细胞选择性强，应用广泛且安全可靠，生产成本低。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种靶向热休克蛋白60的亲和多肽(HSP60)及其筛选方法与用途，其具有良好的亲和性、敏感性及对肿瘤细胞特异靶向性，可制备药物或显影剂，应用于肿瘤的诊断、预防及治疗。

背景技术

恶性肿瘤是全球公认的公共健康问题，其发病率和致死率呈逐年上升趋势。根据国际癌症研究中心估计，未来全球癌症发病人数将以年均3％-5％的速度增长，预计到2020年全球将有2000万新发癌症病例，死亡病例将达到1200万。我国癌症呈现明显的高发态势，且癌症年轻化趋势愈发明显，这严重影响着人们的生活质量和水平。随着分子机制的不断发展和丰富，人类发现癌症和基因密切相关。在分子水平上，靶向作用于突变的癌基因，能精准杀伤癌细胞，于是肿瘤的个体化治疗与靶向治疗应运而生。虽然放化疗和靶向治疗都是全身治疗，但是传统的抗肿瘤化疗药物靶向性差，选择性低，有较大的毒性和不良反应，对正常细胞有一定程度的损伤。随着现代医学的不断研究发展和科学技术日新月异的变化，癌症治疗已经从传统疗法转向分子靶向治疗，治疗的特异性、安全性及有效性将极大的提高，而毒副反应则相对于传统药物较低。

靶向治疗是通过定向阻断癌细胞的增殖转导信号，破坏了癌细胞的代谢，阻止肿瘤血管生成，切断营养物质的供给，从而抑制癌细胞的生长。靶向药物通过特异性作用于靶点，减少或消除了对正常细胞的杀伤作用，治疗效果得到大幅度提高。对于不能耐受化疗或不愿意接受化疗的患者，靶向治疗是首选的方法。靶向给药系统可将药物选择性富集于靶器官，靶组织或靶细胞中。由于抗体药物分子量大，较难渗入到实体瘤组织中且易产生耐药性等问题，因此限制了抗体类药物的临床应用。而多肽类药物以其分子量小、靶向性高、成药性强、活性好、低免疫原性和毒性、易于装载等优势在抗肿瘤的实验研究及临床应用中得到了广泛关注；且多肽在体内不易蓄积，与其他药物的相互作用少，与体内受体的亲和力好。环七肽由于有二硫键的存在，构象更加稳定,在体内不易被降解，可以应用于肿瘤靶向肽的筛选。

热休克蛋白60(HSP60)是线粒体中主要的ATP依赖性伴侣蛋白，属于热休克蛋白家族成员，广泛存在于细菌和哺乳动物中，是细胞在应激条件(如热刺激，高温，高压，低氧)下合成的一类蛋白质。HSP60是由低聚物形成的双环结构，每一个亚基包含3个结构域：顶端域、赤道域、中间域。每七个亚基构成一个环状，双环结构的中央形成了一个巨大的腔隙，将未折叠的蛋白质通过疏水作用绑定。其主要功能有参与热激反应；帮助多肽折叠；促进细胞凋亡，也可促进细胞的存活等。近些年来研究发现HSP60在胶质母细胞瘤、前列腺癌、大肠癌，胰腺癌，卵巢癌等多种癌症中表达异常，因此开发靶向作用于HSP60的肿瘤靶向肽具有十分重要的意义，为开发新型肿瘤靶向治疗提供了新的依据。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种靶向热休克蛋白60的亲和多肽，其特点在于特异性亲和细胞表面的热休克蛋白60(HSP60)，从而选择性地结合肿瘤细胞，特别是这种多肽的筛选方法及上述多肽或其衍生产品在制备靶向HSP60抗肿瘤药物或显像制剂中的用途。

本发明采用以下技术方案实现发明目的：