[发明专利]PCDA囊泡结合CRISPR的快速检测系统及其方法

权利要求书

1.一种PCDA囊泡结合CRISPR的快速检测系统，其特征在于，所述系统包括检测目标物质的试剂R1和R2，所述R1包含待检测的物质或该物质的相关集基团，所述R2包含靶DNA，Cas蛋白-sgRNA复合物和PCDA囊泡。

2.如权利要求1所述的快速检测系统，其特征在于，所述R1包含目标核酸或者小分子特异性抗体和小分子特异识别基团的缓冲体系。

3.如权利要求2所述的快速检测系统，其特征在于，所述系统是通过液体体系中游离的小分子与偶联在小分子特异识别基团上的小分子探针对特异性抗体的结合位点进行竞争原理，并通过囊泡探针由蓝变红的程度受到的抑制情况实现小分子的定性分析。

4.如权利要求2所述的快速检测系统，其特征在于，所述小分子特异识别基团为小分子修饰DNA/RNA探针，所述小分子修饰的DNA/RNA探针包含Cas蛋白识别所需对应PAM序列的核酸序列。

5.如权利要求2所述的快速检测系统，其特征在于，所述小分子为分子量小于2000Da的有机分子；所述小分子包括治疗药物、激素、毒品、农兽药、活体代谢物中的待检小分子。

6.一种PCDA囊泡结合CRISPR的定量检测方法，包括如下步骤：

(1)计算不同浓度标准品反应速度绘制标准曲线

通过自动加样仪器，首先加入标准品，随后加入R1试剂，最后加入R2试剂，测定不同时间点的荧光值，计算不同浓度标准品的反应速率，绘制标准曲线；

(2)计算样本体系中待检物质的浓度

按照步骤(1)的顺序依次向自动加样仪器中加入液体样本、R1试剂、R2试剂，通过样本的反应速率值，并根据标准曲线中反应速率与标准品浓度的关系式得到样本中待检物质的浓度值。

7.如权利要求6所述的快速检测方法，其特征在于，所述R1包含目标核酸；所述R2包含靶DNA，bing buffer，Cas蛋白-sgRNA复合物，PCDA囊泡，所述R2为缓冲体系；所述Cas蛋白-sgRNA复合物和PCDA囊泡可以先后加入也可以同时加入。

8.如权利要求6所述的快速检测方法，其特征在于，所述R1包含生物素；所述R2包含靶DNA，bing buffer，Cas蛋白-sgRNA复合物，PCDA囊泡，所述R2为缓冲体系；所述Cas蛋白-sgRNA复合物和PCDA囊泡先后加入到R1溶液。

9.一种PCDA囊泡结合CRISPR的定性检测方法，包括如下步骤：

(1)准备目标检测物并制备R1溶液；

(2)加入R2溶液进行显色反应，判断检测物是否含有目标物质。

10.一种PCDA囊泡结合CRISPR的快速检测试纸条，其特征在于，所述试纸条包被目标待检物质的检测试剂R2，所述R2包含靶DNA，Cas蛋白-sgRNA复合物和PCDA囊泡。