[发明专利]结直肠癌肿瘤微环境检测试剂、试剂盒、装置及应用

权利要求书

1.一种结直肠癌肿瘤微环境检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括POLE基因突变检测试剂以及如下至少一个组合中的至少一个分子标志物的抗体：

组合1：CD3、CD8、CD45RO、PD-1及PD-L1；

组合2：CD4、FOXP3、CD68、CD163、PD-L1及CD57。

2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括至少CD45RO分子标志物的抗体；优选地，所述检测试剂包括至少CD8和CD45RO两个所述分子标志物的抗体；更优选地，所述检测试剂包括至少如下分子标志物的抗体：CD3、CD8、CD45RO、PD1、PD-L1及CD4。

3.根据权利要求2所述的检测试剂，其特征在于，所述分子标志物的抗体记为一抗，所述检测试剂还包括二抗，

优选地，所述二抗选自辣根过氧化物酶、PV-6001、PV-6002或PV-8000；

优选地，所述检测试剂还包括发光试剂，更优选地，所述发光试剂选自带荧光基团的酪胺盐、520-FITC、540-AF517、570-Cy3、620-Cy3.5、650-Cy5或690-Cy5.5。

4.一种结直肠癌肿瘤微环境检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1至3中任一项所述的结直肠癌肿瘤微环境检测试剂。

5.POLE基因突变检测试剂以及如下至少一个组合中的至少一个分子标志物的抗体在制备检测结直肠癌的肿瘤微环境相关的试剂盒中的应用，

组合1：CD3、CD8、CD45RO、PD-1及PD-L1；

组合2：CD4、FOXP3、CD68、CD163、PD-L1及CD57。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述分子标志物的抗体包括CD45RO的抗体；优选包括CD8的抗体和CD45RO的抗体；更优选地，所述包括至少如下分子标志物的抗体：CD3、CD8、CD45RO、PD1、PD-L1及CD4。

7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述应用包括：

采用POLE基因突变检测试剂检测POLE基因是否突变；以及

采用多重免疫组织化学的方法对所述分子标志物进行检测，优选检测如下至少两种分子标志物的细胞阳性率：CD45RO+的细胞阳性率、CD8+的细胞阳性率及CD8+CD45RO+的细胞阳性率；更优选地，检测CD45RO+及如下至少一种分子标志物的细胞阳性率：CD3+、CD8+、CD8+CD45RO+、CD3+PD1+、PD-L1+及CD4+；

优选地，检测在POLE基因突变的情况下，所述CD45RO+的细胞阳性率是否大于等于4.61％，所述CD8+的细胞阳性率是否大于等于2.78％，所述CD8+CD45RO+的细胞阳性率是否大于等于0.30％，所述CD3+的细胞阳性率是否大于等于5.83％，所述CD4+的细胞阳性率是否大于等于6.42％，所述CD3+PD1+的细胞阳性率是否大于等于0.75％，所述PD-L1+的细胞阳性率是否大于等于2.24％。