[发明专利]一种嵌合抗原受体-单核/巨噬细胞(CAR-M)的构建及其应用

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体-单核/巨噬细胞(CAR-M)，其特征在于，运用基因编辑手段设计、优化适于导入单核/巨噬细胞细胞膜组构，增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体。

2.根据权利要求1所述的增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体，包括前导肽，识别区，铰链区和跨膜区/胞内信号区。

3.根据权利要求1所述的用于增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体，其特征在于，所述前导肽为集落刺激因子2受体α(CSF2Rα)的前导肽，所述CSF2Rα前导肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.根据权利要求1所述的用于增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体，其特征在于，所述识别区为结合肿瘤抗原的单链抗体scFv。

5.根据权利要求1所述的用于增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体，其特征在于，所述铰链区为CD28 hinge区域，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

6.根据权利要求1所述的用于增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体，其特征在于，所述的跨膜/胞内信号区为能够激活巨噬细胞吞噬信号的CD16(SEQ ID NO.4)、CD32(SEQ ID NO.5)、CD64(SEQ ID NO.6)、FCER1G(SEQ ID NO.7)或CD36(SEQ ID NO.8)分子跨膜/胞内功能区。

7.根据权利要求1所述的用于增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括SEQ ID NO.9-SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列。

8.一种编码权利要求1～7中任一项所述的用于增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体的核酸。

9.根据权利要求8所述的核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列包括SEQ IDNO.14-SEQ ID NO.18所示的核苷酸序列。

10.一种含有权利要求8-9中任一项所述的核酸的重组表达载体。

11.一种含有权利要求10所述的重组表达载体的单核/巨噬细胞。

12.一种权利要求11所述的单核/巨噬细胞的构建方法，其特征在于，包括重组表达载体的构建步骤、重组表达载体的包装步骤以及将重组表达载体转导至单核/巨噬细胞的步骤。

13.权利要求1-7中任一项所述的用于增强单核/巨噬细胞吞噬能力的嵌合抗原受体，权利要求8-9中任一项所述的核酸，权利要求10所述的重组表达载体以及权利要求11所述的单核/巨噬细胞在人类实体瘤治疗中的应用。