[发明专利]烟粉虱AsiaII3隐种瞬时感受器离子通道基因的特异性探针及其应用

说明书

本发明属于农业生物领域，具体涉及烟粉虱AsiaII3隐种瞬时感受器离子通道基因的特异性探针及其应用。本发明的烟粉虱AsiaII3隐种瞬时感受器离子通道基因的特异性探针，其核苷酸序列如SEQ No.1所示。本发明的BtTRP的探针序列，对BtTRP基因mRNA的显示有明确的特异性，实现了对BtTRP基因mRNA水平的显示作用。将本发明的特异性探针直接用于成虫进行原位杂交，省去了制作切片步骤，可以降低实验的复杂性，减少实验步骤，且具有较高的敏感度，能够更方便快捷的检测目的基因在虫体的定位表达。

技术领域

本发明属于农业生物领域，具体涉及烟粉虱AsiaII3隐种瞬时感受器离子通道基因的特异性探针及其应用。

背景技术

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)，属半翅目(Hemiptera)，粉虱科(Aleyrodidae)，小粉虱属Bemisia，具有很强的繁殖力和广泛的寄主范围，主要通过直接刺吸、分泌蜜露、传播植物病毒等方式为害多种农作物和园林花卉等，造成了极大的经济损失。烟粉虱是一个包含36个以上隐种的物种复合体。目前我国已有的烟粉虱隐种有15种，包括2个入侵种和13个本地种。入侵种MED(Mediterranean)和MEAM1(Middle East-AsiaMinor 1)隐种在我国广泛分布。本地种只分布在我国局部地区，如AsiaII3隐种主要分布在我国的中南部地区如广西、台湾、湖南、浙江、湖北等地区。

烟粉虱的最适发育温度为26～30℃，发育临界温度在10.8～12.5℃之间，致死高温区在37～42℃之间。17℃和35℃是烟粉虱正常生长发育的最低和最高的温度极限。昆虫作为变温动物其生命活动对温度变化极为敏感，尤其是个体微小的昆虫无法通过调节体表水分的蒸发来适应环境温度的变化，因此，其必有一套其他的温度调节内在机制。

瞬时感受器离子通道TRP(transient receptor potential)是位于细胞膜上的一类重要的离子通道，被激活时，允许包括钙离子在内的阳离子进行跨膜运输。TRP作为感受器中的门控分子，起到外部环境和神经系统中介的作用，可以将热刺激、化学刺激以及机械刺激等转化成内向电流。已有研究表明，TRP是生物感知外界温度的关键通道，在生物体的温度适应性中起着重要的作用。烟粉虱TRP基因的表达可以被温度胁迫所诱导，比如入侵种MED隐种中TRP基因在极端高温40℃以及极端低温0℃条件下表达量达到最高，然而，本地种AsiaII3隐种中TRP基因目前未有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟粉虱AsiaII3隐种瞬时感受器离子通道基因的特异性探针。

本发明的再一目的在于提供上述特异性探针的应用。

根据本发明具体实施方式的烟粉虱AsiaII3隐种瞬时感受器离子通道基因的特异性探针，其核苷酸序列如SEQ No.1所示；

CCACCATTCAACCTATCACCATCCGTTAAATCTATGAAAAGAATGATGGGAATCAAAACTGGGAAAATCAGCACTGGTTCGATGAAGAACAAAAGTCGAGCTAAAGCTATGGAGCGTCACGAAGCAGTCATGAAACTATTGGTCAGGCGATATGTTGTGGCTGAGCAAAGGAAGAGAGATGAGTTCGGCATCACAGAAGATGATGTTATGGAAATTCGACAAGATATTTCAACCCTTCGTTTTGAACTGATCGATATCCTCCGAACGAACGGAATGAAGACACCGAGCGTGGACAAAGAGGATCAAGCAGTGGGCAAGAAAGGTCGTGTGATGGAGCGTCGTTTGCTGAAGGACTTCCAGATCGGCCTGGTTGAGGGTATAATTAGTGATGTTATATCTTCTGAGAAAGAGCCGAAAGATGTCTTCAGCAAAATTGCTCGCGCAATTGGTAAGGACTCTAGTGCTAAGAAAAAGGACTGGAACGCTA