[发明专利]从戊糖和己糖产生乙醇酸的微生物和方法

权利要求书

1.一种重组微生物，其展示出：

i)与其非修饰微生物相比，增加的从D-核酮糖-5-磷酸至D-阿拉伯糖-5-磷酸的转化活性；

ii)与其非修饰微生物相比，增加的从D-阿拉伯糖-5-磷酸至D-甘油醛-3-磷酸和乙醇醛的醛裂解活性；

iii)与其非修饰微生物相比，增加的从乙醇醛至乙醇酸的氧化活性；和

iv)与其非修饰微生物相比，减少的从甘油醛-3-磷酸至1,3-双磷酸甘油酸的氧化活性，

所述重组微生物从戊糖和己糖产生乙醇酸。

2.根据权利要求1所述的重组微生物，其特征在于所述微生物展示出大肠杆菌kdsD基因或其同源物的过表达。

3.根据权利要求1或2所述的重组微生物，其特征在于所述微生物展示出大肠杆菌fsa基因或其同源物的过表达。

4.根据权利要求1至3任一项所述的重组微生物，其特征在于所述微生物展示出大肠杆菌aldA基因或其同源物的过表达。

5.根据前述权利要求任一项所述的重组微生物，其特征在于所述微生物包括：

α)第一质粒，大肠杆菌kdsD基因或其同源物的序列和大肠杆菌fsa基因或其同源物的序列位于其中，所述序列被克隆为操纵子并且在第一诱导型或组成型启动子的控制下，

β)第二质粒，在第二诱导型或组成型启动子的控制下的大肠杆菌aldA基因或其同源物的序列位于其中，

所述第一和第二启动子是相同的或不同的。

6.根据前述权利要求任一项所述的重组微生物，其特征在于大肠杆菌gapA基因或其同源物的表达相对于非修饰微生物是减少的，但不是失活的。

7.根据权利要求1至5任一项所述的重组微生物，其特征在于大肠杆菌gapA基因或其同源物的表达相对于非修饰微生物是失活的。

8.根据前述权利要求任一项所述的重组微生物，其特征在于依赖于磷酸烯醇丙酮酸(PEP)的磷酸转移酶系统(PTS)是失活的，而由通过大肠杆菌galP或运动发酵单胞菌glf或其同源物编码的葡萄糖转运活性和从葡萄糖至葡萄糖-6-磷酸的转化活性与其非修饰微生物相比是增加的。

9.根据前述权利要求任一项所述的重组微生物，其特征在于所述微生物展示出以下特点的至少一种：

v)与其非修饰微生物相比，减少的从乙醇酸至乙醛酸的氧化活性；

vi)与其非修饰微生物相比，减少的涉及调节需氧呼吸代谢的基因的抑制；

vii)与其非修饰微生物相比，减少的乙醇酸内化作用；

viii)与其非修饰微生物相比，减少的从二羟基丙酮不可逆的形成甲基乙二醛的活性；

ix)与其非修饰微生物相比，减少的从果糖-6-磷酸至果糖-1,6-二磷酸的转化活性；

x)与其非修饰微生物相比，减少的从二羟基丙酮磷酸和乙醇醛产生D-核糖-1-磷酸的活性；和

xi)与其非修饰微生物相比，修饰的从D-葡萄糖-6-磷酸至6-磷酸D葡萄糖酸-1,5-内酯的氧化活性。

10.根据权利要求9所述的重组微生物，其特征在于所述从D-葡萄糖-6-磷酸产生6-磷酸-D-葡萄糖酸-1,5-内酯的活性与其非修饰微生物相比是减少的。

11.根据权利要求9所述的重组微生物，其特征在于所述重组微生物展示出下述特点：

xi)与其非修饰微生物相比，增加的从D-葡萄糖-6-磷酸至6-磷酸D-葡萄糖酸-1,5-内酯的氧化活性；

xii)与其非修饰微生物相比，减少的从D-葡萄糖酸-6-磷酸形成2-脱羟基-3-脱氧-D-葡萄糖酸-6-磷酸的活性；和

xiii)与其非修饰微生物相比，减少的从2-脱羟基-3-脱氧-D-葡萄糖酸-6-磷酸形成甘油醛-3-磷酸和丙酮酸的活性。