[发明专利]用于核苷酸链的纳米结构测序的微流体装置和方法

权利要求书

1.用于对核苷酸链进行测序的微流体装置（100），其包括阵列装置（200）和与所述阵列装置（200）连接的纳米结构（300），其中所述阵列装置（200）包括具有用于聚合酶链反应的物质（11、12、13）的阵列单元（221、222、223、224），其中所述阵列单元（221、222、223、224）包含根据桑格测序方法具有终止特性的核苷酸（13）和用于不对称聚合酶链反应的引物（11、12），并且其中纳米结构（300）被设计为确定由聚合酶链反应形成的核苷酸链的长度。

2.根据权利要求1所述的微流体装置（100），其中在所述阵列单元中，所述引物（11、12）各自包含具有多数引物类型（11）和少数引物类型（12）的引物对（11、12），以使得不对称聚合酶链反应具有指数进程和随后的线性进程。

3.根据前述权利要求中任一项所述的微流体装置（100），其中所述纳米结构（300）具有纳米孔（301、302）和/或纳米通道（303）。

4.根据前述权利要求中任一项所述的微流体装置（100），其中阵列单元的一个或多个组（211、212）各自包括四个阵列单元（221、222、223、224），并且其中一组（211、212）的所有阵列单元（221、222、223、224）至少具有相同种类的引物。

5.根据前述权利要求中任一项所述的微流体装置（100），其中各个阵列单元（221、222、223、224）被分配给所述纳米结构（300）的各个检测结构（321、322、323、324），以使得检测结构（321、322、323、324）可以确定来自各自阵列单元（221、222、223、224）的核苷酸链的长度。

6.根据前述权利要求中任一项所述的微流体装置（100），其中可以通过电极（301、302、303）在各个阵列单元（221、222、223、224）和各个检测结构（321、322、323、324）之间施加用于运送和确定核苷酸链长度的电压。

7.根据前述权利要求中任一项所述的微流体装置（100），其中在至少一个阵列单元（221、222、223、224）中预先放置一种或多种抑制性引物（13）以阻止在聚合酶链反应期间预定物类的复制。

8.利用微流体装置（100）对核苷酸链进行测序的方法（600），其包括以下步骤：

·根据桑格测序方法利用装置（100）的阵列装置（200）进行（601）不对称聚合酶链反应以复制核苷酸链；

·通过装置（100）的纳米结构确定（602）被复制的核苷酸链的长度。

9.根据权利要求8所述的方法（600），其中所述不对称聚合酶链反应具有指数进程，特别是定量聚合酶链反应和随后的线性进程。

10.根据权利要求9所述的方法（600），其中监测所述不对称聚合酶链反应，特别是借助一种或多种所用引物的荧光标记。

11.根据权利要求10所述的方法（600），其中识别和监测指数PCR和线性PCR之间的转变，和/或监测线性PCR循环的数量并将其用作开始通过纳米结构确定片段长度的标准。