[发明专利]一种检测TSWV的速测卡及其制备、使用方法在审
申请号: | 201911418774.5 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN111077317A | 公开(公告)日: | 2020-04-28 |
发明(设计)人: | 贾蒙骜;郭玉双;王亚琴;张孝廉;赵会纳 | 申请(专利权)人: | 贵州省烟草科学研究院;浙江大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人: | 张行超 |
地址: | 550081 贵州省贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 tswv 速测卡 及其 制备 使用方法 | ||
1.一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡,包含:底板上依次粘贴的样品垫、金标垫、NC膜以及吸收垫,其特征在于:所述的金标垫固定有胶体金标记的TSWV单克隆抗体,所述的NC膜有一条检测线,固定TSWV特异性多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡,其特征在于:所述的TSWV单克隆抗体由分泌TSWV单克隆抗体的杂交瘤细胞株制备得到。
3.根据权利要求1所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡,其特征在于:所述的金标垫上单克隆抗体的量为5 ng-50 ng,优化的量为48ng;NC膜上多克隆抗体的量为0.4μg-1.2μg,优化的量为0.6μg。
4.根据权利要求2所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡,其特征在于:分泌TSWV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,保藏编号为CCTCC NO:C2019179。
5.根据权利要求1所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡,其特征在于:还包括封盖板,所述的封盖板设置加样孔和结果观察孔,加样孔对应样品垫的位置,结果观察孔对应金标垫和NC膜位置。
6.如权利要求1-5之一所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡的制备方法,其特征在于:(1)将TSWV的特异性多克隆抗体和二抗分别固定于NC膜上;(2)在碱性条件下将胶体金颗粒与抗TSWV特异性单克隆抗体通过静电作用力相互结合;(3)速测卡的组装:底板上依次粘贴的样品垫、金标垫、NC膜以及吸收垫,加盖封盖板与底板合并形成速测卡。
7.根据权利要求1-5之一所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡的使用方法,其特征在于:首先于加样孔中加入样品溶液并水平放置,1min后,于结果观察孔中观察颜色变化,作出判断;如果只有控制线C线,没有相应的检测线T线,则表明为待检物质为阴性;既有控制线C线,又有相应的检测线T线,则表明待检物质为阳性。
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