[发明专利]一种猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定方法

说明书

本发明公开了一种猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定方法，涉及农业栽培技术领域，该方法包括以下步骤：首先制备接菌器官，在春季将猕猴桃不同种类品种一年生嫁接苗盆栽，新梢长至3‑6个月后，选择完全木质化的新梢节间作为接种器官；然后进行菌株活化和定量，之后将活化后的细菌悬浮液穿刺接入接种器官，20天后在发病部位剖去长度为15mm、宽5mm的韧皮部，测量发病病斑纵径大小，并做差异显著性分析；本发明提供的方法具有操作简便、鉴定快速、结果准确等特点。

技术领域

本发明涉及农业栽培技术领域，尤其涉及的是一种猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定方法。

背景技术

猕猴桃细菌性溃疡病(kiwifruit bacterial canker)是一种由丁香假单胞菌猕猴桃致病种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)引起的毁灭性病害，严重威胁猕猴桃生产发展。其发生范围广、传播快、致病性强、防治难度大，可在短期内造成大面积树体死亡，已被列为我国森林植物检疫性病害。该病于1989年在日本静冈首次发现并鉴定其病原物，目前已在美国、日本、法国，新西兰，韩国、伊朗、意大利、葡萄牙及智利等国，及我国陕西、安徽、重庆、四川、湖北、湖南、河南和河北等省市发生，给世界猕猴桃产业造成了严重的经济损失。

自2008年以来，猕猴桃溃疡病突然在新西兰、意大利、中国、智利等猕猴桃主要生产大国大规模爆发，主要为害‘Hort16A’、‘红阳’等具有重要经济价值的品种。以新西兰为例，2010年11月出现严重危害，截至2013年2月20日，已有2073个猕猴桃园确认感染了致病力最强的溃疡病病原菌PSA-V，约占新西兰猕猴桃园总面积的70％；受溃疡病的影响，2012年新西兰猕猴桃出口量从2011年的41.47万吨降至32.40万吨，同比减少21％；2013-2014年猕猴桃出口量将进一步减少。该病害在我国陕西、四川、贵州等猕猴桃主产区普遍发生，不同地域、海拔、栽培品种的果园均可能感染，病株率普遍达到20％左右，感染严重的果园达到70％以上，很多果园因死树率过高而导致毁园，损失惨重。

目前，猕猴桃溃疡病的感染范围正逐渐扩大，其远距离传播主要通过苗木、接穗的引种，对于该病的侵染原理、流行规律、快速鉴定及防治等方面研究，虽然取得一些进展，但由于此病害流行迅速、难以防控、危害巨大，选择抗性种质资源、培育抗病品种显得尤为重要。然而，对于猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定技术及其应用，国内外迄今尚未见报道。

新西兰学者初步研究表明，‘红阳’感病率最高，‘Hort16A’、‘Gold3’、‘Gold9’、‘海沃德’的感病率逐渐降低，‘Green14’的抗病性最好。在我国，张学武等(2000年)研究表明，‘秦美’溃疡病发病最严重，而‘秦香’、‘秦翠’发病率很低；李淼等(2004年)对安徽省内主栽的7个猕猴桃品种进行溃疡病的抗性研究，发现‘金魁’与‘魁蜜’为抗病的品种，‘早鲜’、‘华美2号’、‘海沃德’中感，‘秦美’、‘金丰’最感病；申哲、高小宁等(2009-2011年)分别对陕西省不同品种猕猴桃溃疡病的发生率进行研究表明，‘红阳’感病率最高，‘海沃德’、‘亚特’及‘秦美’感病率依次降低，‘徐香’抗性较强。

但是，由于上述各项研究主要通过田间抗性实际调查方法，采用的操作和统计方法存在差异，且植株的生长环境，园区管理程度不同，因此，还无法对猕猴桃各个品种资源的抗溃疡病的能力做出系统与客观的评价。另外，国内外对猕猴桃品种抗病机理研究较少，基于猕猴桃抗病的形态学、细胞学及生理生化等特征虽有研究报道，目前尚不能用于品种资源的抗性准确鉴定。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定方法，该方法包括以下步骤：

步骤1、制备接菌器官