[发明专利]一种猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定方法

权利要求书

1.一种猕猴桃对溃疡病抗性的鉴定方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤1、制备接菌器官

在春季时将猕猴桃不同种类品种一年生嫁接苗进行盆栽，当新梢生长至3-6个月时，选择完全木质化的新梢节间作为猕猴桃溃疡病菌的接种器官，每个新梢节选定3-5个接种点

步骤2、菌株活化定量

菌株活化：将猕猴桃溃疡病菌的菌株置于-80℃冰箱长久保存，接种前取出部分-80℃保存的菌种，置于液体KB培养基中，25℃活化48小时，获得活化后的菌液，然后取部分活化后的菌液接种于固体KB培养基斜面，25℃培养，48小时，4℃保存，获得准备液；其余活化后的菌液加入甘油置于-80℃留作备份

菌株定量：调整准备液的浓度至10⁸CFU/mL，获得接种细菌悬浮液

步骤3、接种

用洁净的牙签，蘸取约2μL的细菌悬浮液，穿刺嫁接苗新梢第二、三、四节间，深达木质部，单盆小区，三次重复，清水对照；各品种盆栽苗顺序排列，置于温度20℃、相对湿度90％的人工气候室培养；接种后一周，开始观察其发病情况

步骤4、鉴定抗性

接菌20天后，在发病部位剥去长约15mm、宽约5mm的韧皮部，用游标卡尺测量每个品种各接种点发病病斑纵径大小，并对数据做差异显著性分析；新梢病斑纵径越大，表示该品种对猕猴桃溃疡病抗性越弱。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中还包括为保证菌种活性，在试验期间4℃保存的菌液需每两周更新一次；步骤2所有的操作均需在超净工作台中完成。