[发明专利]一种乳腺癌miRNA标记物及其应用

说明书

本发明提供了一种miRNA标记物，该miRNA标记物是miR‑4443。本发明利用NCBI GEO数据检索出符合要求的乳腺癌miNRA数据集和乳腺癌mRNA数据集，对上述数据集进行分析，筛选到一种与乳腺癌密切相关的miRNA‑miR‑4443。miR‑4443可用于判断乳腺癌发生风险。经检验证明，miR‑4443可有效区分乳腺癌样本与正常样本。在此基础上，miR‑4443还可以用于制备抑制乳腺癌增殖或侵袭的药物。本发明为乳腺癌的分子机理研究提供了新的思路，同时为临床在分子水平上诊断乳腺癌发生、转移提供了新的诊断方法，并为乳腺癌治疗提供新的药物靶点。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种乳腺癌miRNA标记物及其应用。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，其发病率、死亡率逐年递增，远高于全国平均增长水平，且发病年龄呈现年轻化趋势(高发年龄段比世界平均发病年龄提前了10岁)，为威胁女性健康的头号杀手。手术是目前治疗乳腺癌最有效的手段，然而，相当一部分患者诊断时已经处于中晚期，不能通过根治性手术治愈。虽然曲妥珠单抗的出现对乳腺癌患者治疗产生了革命性的影响，但是对其HER2阴性的患者无效。由于大部分乳腺癌缺乏针对性治疗靶点，目前临床上多采用传统手段进行干预，不能有效地降低其复发、转移及死亡风险，给家庭社会带来沉重负担。因此，进一步阐明乳腺癌的发病机制，寻找新的治疗靶点，对提高乳腺癌治疗、改善患者预后具有极其重要作用。

microRNA(miRNA)是一类长度21～25个核苷酸的小分子RNA。通过与mRNA 3’非翻译区互补结合，在转录后水平抑制靶基因的表达。mi RNA在肿瘤多个阶段发生过程中具有独特的表达特征和生物学功能，且具有分子小、检测途径及方式多样、灵敏度高、易于体外合成及给药等特点，在肿瘤分子诊断和治疗方面具有广泛的应用前景。

发明内容

本发明的目的是针对解决上述技术问题，提出一种可用于判断乳腺癌发生风险的miRNA标记物及其应用。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明通过比较正常癌旁组织及细胞和乳腺癌组织及细胞中miR-4443的表达，并通过将anti-miR-4443转染到乳腺癌细胞中，观察抑制miR-4443对乳腺癌细胞增殖侵袭的影响，进而探讨其自乳腺癌发生发展过程中的作用机制。

本发明首先提供了miR-4443在制备诊断、预防和/或治疗乳腺癌的产品中的应用，所述miR-4443选自以下组中的至少一种：miR-4443初始miRNA、miR-4443前体miRNA、成熟miR-4443；所述miR-4443初始miRNA能在人细胞内被剪切并表达成成熟miR-4443；所述miR-4443前体miRNA能在人细胞内被剪切并表达为成熟miR-4443。

在本发明的一些具体的实施方式中，所述miR-4443是成熟miR-4443，如SEQ IDNO:1所示。

虽然在某些具体实施方式中所使用的是成熟miR-4443，但是本领域技术人员可以预期，初始miRNA(pi-miR-4443)、前体miRNA(pre-miR-4443)将可以获得与成熟miR-4443同样的技术效果，因为细胞有进一步将初始miRNA(pi-miR-4443)、前体miRNA(pre-miR-4443)加工为成熟miR-4443的能力。

优选的，所述miR-4443在乳腺癌样本中的表达上调。

进一步地，本发明提供一种检测乳腺癌的芯片，所述芯片包括固相载体；以及固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括特异性地对应于所述的miR-4443的部分或全部序列。

所述的miRNA芯片的制备可采用本领域已知的生物芯片的常规制造方法。