[发明专利]一种固定化载体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种固定化载体，其特征在于，采用PVA-Na.Alg混合凝胶液进行二次交联方法的制备方法获得。

2.如权利要求1所述的固定化载体，其特征在于，所述的二次交联方法为采用PVA-Na.Alg混合凝胶液在一次交联剂五硼酸铵水溶液中进行一次交联，再在二次交联剂AlCl₃和FeCl₃的混合液中进行二次交联，然后再用固定剂固化，再进行增殖培养。

3.一种制备权利要求1或2所述的固定化载体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)PVA-Na.Alg混合凝胶液；

(2)液体种子液与凝胶液混匀，定容；

(3)PVA-Na.Alg混合凝胶液在五硼酸铵水溶液中进行一次交联；

(4)在AlCl₃和1-3％FeCl₃混合液中进行二次交联；

(5)固定剂固化；

(6)增殖培养。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的PVA-Na.Alg混合凝胶液包括聚乙烯醇、海藻酸钠、活性炭、酵母膏，以质量百分比计，各组分组成为：聚乙烯醇10-12％，海藻酸钠0.3-1.0％，活性炭3-6％，酵母膏余量。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)中聚乙烯醇、海藻酸钠、活性炭、酵母膏的乳质量比为：(9-11):(1-0.1)；(1-5):(02-1.2)。

6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)或(3)中，液体种子液与PVA-Na.Alg混合凝胶液在五硼酸铵水溶液中进行，所述液体种子液的菌株为为可降油菌，优选为芽孢杆菌(Bacillus sp.)或微杆菌(Microbacterium sp.)或两者的组合。

7.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述的二次交联中，AlCl₃的质量百分浓度为：1-3％，FeCl3的质量百分浓度为：1-3％。

8.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(5)所述的固定剂为：Na₂SO₄。

9.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(6)所述的增殖培养的培养基包含：1-5％葡萄糖，0.2-0.5％酵母膏，0.1-0.5％NH4NO3,0.02％MgSO4·7H2O,0.02％KCl,pH＝7.2-7.4。

10.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(6)所述的增殖培养的条件为：转速140rpm-145rpm、28℃-30℃条件下，培养18-20小时。