[发明专利]一种联合水解菌体蛋白和大豆蛋白的工艺

说明书

本发明属于生物技术领域，公开了一种联合水解菌体蛋白和大豆蛋白的工艺，其包括如下步骤：按照重量比2‑4:1取菌体蛋白和大豆蛋白，然后按照1g：5‑10ml的比例添加酸的水溶液，搅拌均匀，然后以置于高速剪切机剪切，静置30‑90min，再以超声波处理，静置2h，然后调整pH为3.0，温度为40℃，再添加酸性蛋白酶，酶解时间为4‑6h，然后调整pH为7.0，温度为50℃，再添加沙雷肽酶，酶解时间为4‑6h，最后灭酶，得到水解液。本发明工艺适合联合水解菌体蛋白和大豆蛋白，水解度和营养价值高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种联合水解菌体蛋白和大豆蛋白的工艺。

背景技术

菌体蛋白是微生物发酵生产氨基酸的过程中的副产品，含有丰富的蛋白质和其他营养物质。研究表明，采用菌体蛋白酶解液替代豆粕水解产物作为氮源来培养微生物，对微生物的发酵影响并不大，申请人在实际的工业生产中偶然发现，菌体蛋白水解产物中添加一定比例的豆粕水解产物，能够提高微生物发酵生产苏氨酸的产量，但是考虑到豆粕水解产物中含有一定的色素等杂质，不利于后续苏氨酸的纯化，因此，可以采用大豆蛋白水解产物进行替换，考虑到操作的简便性和可控性，可以将菌体蛋白和大豆蛋白进行联合水解，但是两种蛋白结构和组分存在较大的差异，适合菌体蛋白的水解工艺并不能适合大豆蛋白，反之亦然，现有技术并没有对二者联合水解的工艺参数进行详细的阐述，如何对菌体蛋白和大豆蛋白进行联合水解，以简化程序，降低能耗，使得营养价值最大化，从而更有效地提升苏氨酸的发酵效率，是工业化生产过程中需要解决的技术问题。

文献1“大豆蛋白水解物中肽分子分布的研究，中国粮油学报2001年”研究采用超滤法与凝胶过滤色谱(GFC)相结合实验方法就大豆蛋白酶解产物寡肽混合物的分子量的分布状况进行了测定。研究结果表明,木瓜蛋白酶与Asl.398蛋白酶的酶解物中以分子量在1000 D以下的小肽为主:木瓜蛋白酶解产物中分子量1000 D以下的占63.9%,1000～2000 D之间的4.64%,2000～4000 D之间的占8.21%,4000～10000 D之间的占8.20%,分子量10000D以上的占15%;As1.398蛋白酶酶解物中分子量1000 D以下的占72.1%,1000 D～2000 D的占6.42%,2000 D～4000 D之间的占2.5%,4000～10000 D之间的占3.92%,10000 D以上的占15%。然而，单独的木瓜蛋白酶或者Asl.398蛋白酶对菌体蛋白的水解效率较差，不合适共同水解。文献2“酶解高水解度大豆蛋白肽的研究，粮油加工与食品机械2005年”通过对中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3种酶对大豆分离蛋白水解程度的研究，优化试验方案,探索制备高水解度大豆蛋白水解液的条件组合，并对3种酶进行了比较,以找出适合于大豆蛋白水解的蛋白酶。文献3“中性蛋白酶水解红曲霉菌体蛋白的研究，中国调味品2011年”为了使红曲霉菌体滤渣得到高值化利用，对红曲霉菌体的酶解条件进行了研究。采用中性蛋白酶对红曲霉菌体进行酶解，通过单因素试验和正交试验，确定了最佳的酶解条件：酶解pH为6．5，酶解温度为45℃，底物浓度为35g／L，酶量为6000U／g（菌体），酶解时间为16h。在最佳条件下进行验证试验，酶解的水解度为9.12％，总水解度为14．73％。该研究得到的水解度偏低，而且水解方法也不能完全照搬应用于水解大豆蛋白。申请人之前的专利技术“一种利用菌体蛋白酶解液代替酵母粉的L-色氨酸绿色生产方法”对菌体蛋白酶解进行系统研究，提高了水解度。申请人继续进行改进和优化，以得到适合同时水解菌体蛋白和大豆蛋白的水解体系。

发明内容

为了能够同时对菌体蛋白和大豆蛋白进行联合水解，以提高发酵效率，克服现有技术的不足，本发明提供了一种联合水解菌体蛋白和大豆蛋白的工艺。

本发明是通过如下方案来实现的。

一种联合水解菌体蛋白和大豆蛋白的工艺，其包括如下步骤：