[发明专利]OprJ-N-M融合基因及其融合蛋白、融合蛋白制备方法以及用途

权利要求书

1.一种OprJ-N-M融合基因，其特征在于，所述OprJ-N-M融合基因的碱基序列如SEQ IDNO:1所示。

2.一种OprJNM融合蛋白，其特征在于，所述OprJNM融合蛋白是通过如权利要求1所述的OprJ-N-M融合基因表达而获得的，所述OprJNM融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；

所述OprJNM融合蛋白的氨基酸序列从N端到C端依次包括：绿脓杆菌外排泵蛋白MexCD-OprJ的结构域a、柔性连接体、绿脓杆菌外排泵蛋白MexEF-OprN的结构域b、柔性连接体、绿脓杆菌外排泵蛋白MexAB-OprM的结构域c；

其中，柔性连接体的氨基酸序列为AEAAAKEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKEAAAK；

其中，所述绿脓杆菌外排泵蛋白MexCD-OprJ的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，所述绿脓杆菌外排泵蛋白MexEF-OprN的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示，所述绿脓杆菌外排泵蛋白MexAB-OprM的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。

其中，所述绿脓杆菌外排泵蛋白MexCD-OprJ是通过OprJ基因表达而获得的，所述OprJ基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示，所述绿脓杆菌外排泵蛋白MexEF-OprN是通过OprN基因表达而获得的，所述OprN基因的碱基序列如SEQ ID NO:3所示。

3.一种OprJNM融合蛋白的制备方法，其特征在于，包括：

提供一种OprJ-N-M融合基因，所述OprJ-N-M融合基因为如权利要求1所述的OprJ-N-M融合基因；

将所述OprJ-N-M融合基因与载体pET28a通过NcoI和XhoI双酶切后，通过T4 DNA连接酶连接，得到重组质粒pET28a-OprJ-N-M；

在预设培养条件下，培养所述重组质粒pET28a-OprJ-N-M转化至大肠杆菌BL-21菌株中，进行培养；

分离纯化，得到所述OprJ-N-M融合基因所表达的所述OprJNM融合蛋白。

4.根据权利要求2所述的OprJNM融合蛋白在制备预防绿脓杆菌感染的药物中的用途。

5.一种免疫原性组合物，其特征在于，包括：

如权利要求2所述的OprJNM融合蛋白；以及

医药上可接受的载剂。

6.根据权利要求5所述的免疫原性组合物，其特征在于，

所述载剂选自：氢氧化铝、磷酸铝和磷酸盐处理的氢氧化铝中的至少一种。