[发明专利]一种检测人CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒

权利要求书

1.一种检测人CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒，其特征在于，包括：CYP2C9*2引物及其探针、CYP2C9*3引物及其探针、VKORC1引物及其探针、内控引物及其探针；

所述CYP2C9*2引物及其探针为：

野生上游引物F1：SEQ ID NO：1所示序列；

突变上游引物F2：SEQ ID NO：2所示序列；

公用下游引物R1：SEQ ID NO：3所示序列；

公用探针Probe1：SEQ ID NO：4所示序列；

所述CYP2C9*3引物及其探针为：

野生上游引物F3：SEQ ID NO：5所示序列；

突变上游引物F4：SEQ ID NO：6所示序列；

野生下游引物R2：SEQ ID NO：7所示序列；

突变下游引物R3：SEQ ID NO：8所示序列；

公用探针Probe2：SEQ ID NO：9所示序列；

所述VKORC1引物及其探针为：

野生上游引物F5：SEQ ID NO：10所示序列；

突变上游引物F6：SEQ ID NO：11所示序列；

公用下游引物R4：SEQ ID NO：12所示序列；

公用探针Probe3：SEQ ID NO：13所示序列；

所述内控引物及其探针为：

内控上游引物F7：SEQ ID NO：14所示序列；

内控下游引物R5：SEQ ID NO：15所示序列；

内控探针Probe4：SEQ ID NO：16所示序列；

所述试剂盒的反应体系包括野生型反应体系和突变型反应体系；

所述野生型反应体系为：

模板DNA：0.1~100ng/μL；

野生上游引物F1：0.2~0.3μM；

公用下游引物R1：0.2~0.3μM；

公用探针Probe1：0.1~0.2μM；

野生上游引物F3：0.2~0.3μM；

野生下游引物R2：0.2~0.3μM；

公用探针Probe2：0.1~0.2μM；

野生上游引物F5：0.2~0.3μM；

公用下游引物R4：0.2~0.3μM；

公用探针Probe3：0.1~0.2μM；

内控上游引物F7：0.2~0.3μM；

内控下游引物R5：0.2~0.3μM；

内控探针Probe4：0.1~0.2μM；

MgCl₂：5~15mM；

PEG6000：0.5%~1.5%（W/V）；

dNTPs：100~300μM；

叠氮化钠：0.005%~0.015%（V/V）；

无甘油修饰酶：1~10U；

冻干保护剂：10%~100%（W/V）；

PCR缓冲液：10~50μL；

所述突变型反应体系为：

模板DNA：0.1~100ng/μL；

突变上游引物F2：0.2~0.3μM；

公用下游引物R1：0.2~0.3μM；

公用探针Probe1：0.1~0.2μM；

突变上游引物F4：0.2~0.3μM；

突变下游引物R3：0.2~0.3μM；

公用探针Probe2：0.1~0.2μM；

突变上游引物F6：0.2~0.3μM；

公用下游引物R4：0.2~0.3μM；

公用探针Probe3：0.1~0.2μM；

内控上游引物F7：0.2~0.3μM；

内控下游引物R5：0.2~0.3μM；

内控探针Probe4：0.1~0.2μM；

MgCl₂：5~15mM；

PEG6000：0.5%~1.5%（W/V）；

dNTPs：100~300μM；

叠氮化钠：0.005%~0.015%（V/V）；

无甘油修饰酶：1~10U；

冻干保护剂：10%~100%（W/V）；

PCR缓冲液：10~50μL。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述冻干保护剂为海藻糖和/或甘露醇。