[发明专利]用于几种鲟鱼物种鉴定的SSR引物对组、试剂盒、鉴定方法及应用

权利要求书

1.一种用于几种鲟鱼物种鉴定的SSR引物对组，其特征在于，包括正向引物P4-58F和反向引物P4-58R，其中正向引物P4-58F具有如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列，反向引物P4-58R具有如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列；

SEQ ID NO.1所示核苷酸序列为ACCCTGAAAAGAAAGGGGAA；

SEQ ID NO.2所示核苷酸序列为TATGGGCCAAAAGGAACAAG；

所述鲟鱼包括俄罗斯鲟、中华鲟、长江鲟、欧鳇和闪光鲟。

2.如权利要求1所述的SSR引物对组，其特征在于，所述正向引物P4-58F可用荧光染料进行标记。

3.一种用于几种鲟鱼物种鉴定的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的SSR引物对组，所述鲟鱼包括俄罗斯鲟、中华鲟、长江鲟、欧鳇和闪光鲟。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：水、PCR缓冲液、dNTPs、DNA聚合酶、上样缓冲液中的一种或多种。

5.一种几种鲟鱼间的物种鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、提取待鉴定的俄罗斯鲟、中华鲟、长江鲟、欧鳇和闪光鲟的DNA样本；

S2、合成如权利要求1所述的SSR引物对组，且利用所述SSR引物对组、以步骤S1中获取的DNA样本为模板进行PCR扩增；

S3、对经步骤S2获得的PCR扩增产物进行检测，以获得PCR扩增产物多态性原始数据；

以及S4、对PCR扩增产物多态性原始数据进行分析，以得出测序峰图数据，并根据所述测序峰图数据对俄罗斯鲟、中华鲟、长江鲟、欧鳇和闪光鲟进行鉴定。

6.如权利要求5所述的鉴定方法，其特征在于，在进行PCR扩增时，所述正向引物P4-58F的退火温度为52～60℃；所述反向引物P4-58R的退火温度为50～59℃。

7.如权利要求6所述的鉴定方法，其特征在于，在进行PCR扩增时，所述正向引物P4-58F与反向引物P4-58R的退火温度均为52℃。

8.如权利要求1所述的SSR引物对组和/或如权利要求3所述的试剂盒和/或如权利要求5中所述的鉴定方法在俄罗斯鲟、中华鲟、长江鲟、欧鳇和闪光鲟的种间鉴定/种质鉴定/家系管理中应用。

9.一种分离的SSR标志物，其特征在于，其通过权利要求1所述的SSR引物对组、以俄罗斯鲟的DNA样本为模板进行扩增获得。

10.如权利要求9所述的SSR标记物，其特征在于，所述SSR标志物包括长度分别为124bp、134bp和145bp的3种特异性基因片段。