[发明专利]一种利用果渣制备低甲氧基果胶的方法

说明书

一种利用果渣制备低甲氧基果胶的方法，包括：（1）制备黑曲霉液体种子，（2）黑曲霉固体发酵，（3）制备复合酶，（4）复合酶处理果渣，（5）酸水解与提取，（6）乙醇沉淀与过滤，（7）清洗与烘干。本发明以黄桃、梨、苹果、蓝莓、橙、柚子等榨汁后的果渣为原料，固体发酵黑曲霉制备复合酶，以复合酶处理果渣以实现细胞壁溶解和果胶脱脂；然后通过酸解、醇沉、清洗、烘干等制备得到低甲氧基果胶。

技术领域

本发明属于农产品精深加工技术领域，涉及一种利用果渣制备低甲氧基果胶的方法。

背景技术

果胶是一种无毒的天然食品添加剂，是植物细胞壁的重要组成成分。果胶是一种植物多糖聚合物，其基本组成是部分甲酯化的半乳糖醛酸单元，通常按其甲氧基含量将其分为两大类：高甲氧基果胶（HMP）、低甲氧基果胶（LMP）。

HMP一般是指酯化度或甲酯化度大于50%，即甲氧基含量高于7%的果胶；LMP是指甲酯化度介于25-50%之间，即甲氧基含量低于7%的果胶。HMP只有在可溶性固形物高于55%和pH范围在2.0~3.5之间才能胶凝，主要用于高糖类食品的生产。

LMP不完全受pH值和糖度（共熔物）的制约，对凝胶条件要求低。LMP形成凝胶的速率随着果胶甲酯化度的降低而加快。LMP在满足人们对低糖、低热量、低甜度食品要求方面意义显著。近年来，由于肥胖、糖尿病患者的数量呈上升趋势，低糖食品需求量提升显著。由于LMP作为食用胶用于低糖食品具有无可比拟的优势，因而，导致LMP的市场需求量巨大。

黑曲霉，半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属真菌中的一个常见种。广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。是重要的发酵工业菌种，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用果渣制备低甲氧基果胶的方法。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种利用果渣制备低甲氧基果胶的方法，包括下列步骤：

步骤1：向黑曲霉菌种保藏斜面加入无菌水，用接种铲将斜面中的孢子刮下，制成菌种悬液；按2.5-5%的接种量将菌种悬液接入灭菌后的液体种子培养基中，在温度30-35℃、转速100-200r/min的摇床中培养4-6d，得到黑曲霉液体种子；

步骤2：在空气洁净级别为1万级的净化环境中，在25-30℃条件下，按1-5%的接种量，将黑曲霉液体种子与蒸汽灭菌后的固体培养基混合均匀，然后铺设成1.5-2.5cm厚度的浅盘，保持环境相对湿度60-75%，发酵5-7d，得到固体发酵产物；

步骤3：向固体发酵产物中添加固体培养基质量9-12倍的蒸馏水，浸泡后过滤，得到的滤液即为粗酶液；在25±5℃温度条件下，向粗酶液中加入硫酸铵，静置后过滤得到沉淀物，将沉淀物用纯化水清洗，即得黑曲霉发酵得到的复合酶；

步骤4：向果渣中添加其4-5倍质量的纯化水，然后添加果渣质量0.5-1.0%的步骤3制得的复合酶，保持温度40-45℃、以转速45-60r/min搅拌处理60-90min，得到果渣混合液；

步骤5：向果渣混合液中加入盐酸，调节pH值至2.0-2.5，然后升温并保持温度90-92℃、以转速30-60r/min搅拌处理60-90min；获得的溶液过滤后得到的滤液为果胶提取液；

步骤6：向果胶提取液中加入乙醇，使混合液的乙醇的质量百分比含量为50-65%，静置60-90min；将混合液采用60-80目滤网过滤，收集固体截留物；

步骤7：将固体截留物采用纯化水反复清洗3-5次，然后将固体截留物在真空表压-0.09～-0.10MPa、温度60-65℃环境下烘干至含水量小于或等于5%，粉碎后即得到低甲氧基果胶。