[发明专利]不饱和阳离子脂质衍生物、制备方法以及在质粒递送系统中的应用

说明书

本发明涉及化学与制剂领域，具体涉及不饱和阳离子脂质衍生物及其制备方法和在质粒递送系统中的应用。本发明的阳离子脂质以正电性的赖氨酸作为亲水头基，以氨基酸作为骨架，以不饱和烷烃链作为疏水尾链，具有生物相容性好、安全性高等优势；合成方法简便快捷，合成成本低，有利于大规模生产。基于本发明设计的不饱和阳离子脂质构建的阳离子脂质体，能稳定荷载质粒不发生泄漏，在多种肿瘤细胞及原代细胞上的基因转染效率优于阳性对照Lipofectam ine2000，并且对细胞无明显细胞毒作用。本发明将为质粒递送提供一类安全高效的阳离子脂质及非病毒载体平台。

技术领域

本发明涉及化学与制剂领域，具体涉及不饱和伯胺类阳离子脂质衍生物、制备方法以及在质粒递送系统中的应用。

背景技术

基因治疗是将外源基因，如质粒(DNA)、小干扰RNA(siRNA)、mRNA等，导入靶细胞以纠正或补偿因基因缺陷或基因表达异常引起的疾病，包括遗传疾病、恶性肿瘤、代谢性疾病、心血管疾病以及自身免疫性疾病等。其中，质粒是一类能够进行自主复制的遗传单位，与其他基因治疗物质相比，具有持续表达等优势，因此受到广泛研究。

但是游离质粒因为其水溶性、负电性、易被核酸酶降解以及需入核表达等特点，直接注射难以发挥有效的治疗作用，因此亟需发展安全高效的递送载体以提高其基因转染效率。常见的递送载体包括病毒载体和非病毒载体两大类。病毒载体虽然转染效率高，但其潜在的免疫原性、致癌性等安全风险以及载量小等缺点限制了其临床应用。而非病毒载体具有安全性好、载量大、成本低及可大量制备等优点，得到广泛关注，但其转染效率较低仍然是限制其发展的主要原因。其中阳离子脂质体是一种类似于生物膜的具有双分子层结构的封闭囊泡，由阳离子脂质和辅助脂质(如磷脂，胆固醇等)制备而成。因其良好的生物相容性，受到越来越多的关注。目前FDA批准的第一个系统给药的siRNA药物就是以阳离子脂质体作为载体。

与递送siRNA类似，阳离子脂质体也可以利用其正电性与负电性的DNA通过静电作用形成稳定复合物用于DNA递送。但是由于DNA的分子量远大于siRNA以及其更强的负电荷，使得DNA与阳离子脂质体的相互作用更强，更难从载体中释放进入胞质并进入细胞核发挥作用，造成DNA的递送难度显著提高。因此需针对DNA设计适宜的安全高效载体。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一类尾链不饱和的阳离子脂质衍生物。

本发明的另一目的是提供该尾链不饱和的阳离子脂质衍生物的应用。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：

本发明公开一类尾链不饱和的阳离子脂质衍生物，具有通式(I)或(II)的结构。

其中，n＝1或2；

R¹＝含1～3个不饱和键的C15～23直链烃基，或

R²＝氢、取代或未取代的C1-4烷基，所述的取代基选自苯基、苄基、芳香杂环、羟基、酰基、硫醇基。

所述的尾链不饱和的阳离子脂质衍生物，优选n＝1或2；

其中，

双键为Z构型或E构型；

该不饱和阳离子脂质衍生物以具有生物相容性的赖氨酸作为阳离子脂质分子的亲水部分，提供正电荷，与DNA静电结合以增强DNA递送过程中的稳定性。