[发明专利]植物多基因控制性状的单基因分离群体构建方法

权利要求书

1.植物多基因控制性状的单基因分离群体构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

（1）选差异性状明显的亲本杂交得到F₁代，F₁代自交得到F₂代，构建F₂代群体；

（2）对亲本进行测序并和参考基因组序列比对；比对结果正常后，根据InDel位点设计引物；

（3）基因定位：对步骤（1）的F₂群体进行基因定位，关联出控制某个性状的的多个相关基因，所述性状存在开关基因；选取某一非开关基因，作为目标基因进行后续分析；

（4）根据步骤（3）的多个相关基因或基因候选区域分别设计两对多态性的InDel标记引物；所述步骤（4）InDel标记引物对应的引物序列如下：

（5）单基因分离群体构建：利用步骤（4）的多态性InDel标记引物去分析F₂群体或F₂群体回交后代的基因型，筛选出目标基因为杂合片段，其他非目标基因为显性纯合片段的植株；并将该植株发展成为群体，即构建得到单基因分离群体；

步骤（3）所述的相关基因分别为：开关基因Kala4，相关基因Rd，BP2，BP3，BP3.2，OsCHI，BP6，BP9和BP12；目标基因为BP3.1；

步骤（5）所述分析F₂群体或F₂群体回交后代的基因型方法为：用InDel标记引物去分析F₂群体中每个单株的基因型，找出目标基因杂合，其它基因显性纯合的子代植株，如果在F₂群体中没有找到相关植株，就将F₂代与显性纯合的亲本进行回交，回交1代记为F₃代，回交2代记为F₄代，然后收获F₂、F₃、F₄代种子种植，继续采用上述InDel标记引物鉴定基因型，直至筛选到目标基因杂合，其它连锁基因显性纯合的植株；

所述植物为水稻；

步骤（1）所述亲本为东兰墨米和黄华占，其中，东兰墨米为显性纯合亲本；

步骤（3）所述性状为种皮花青素；

所述目标基因的精细定位方法还包括：利用构建得到的单基因分离群体通过代换作图法定位目标基因。