[发明专利]基于ASP基因表达量差异鉴定清溪乌鳖品系和日本品系的方法

权利要求书

1.基于ASP基因表达量差异鉴定清溪乌鳖品系和日本品系的方法，其特征在于，该鉴定方法通过对待鉴定中华鳖腹部皮肤ASP基因的表达量进行检测，若ASP基因相对表达量值≥0.04，则确定为日本品系，若ASP基因相对表达量值＜0.04，则确定为清溪乌鳖品系。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，提取待鉴定中华鳖腹部皮肤组织RNA进行反转录，得到cDNA，然后以cDNA为模板进行qRT-PCR扩增，以GAPDH基因作为内参，其中ASP基因扩增的引物序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示；GAPDH基因扩增的引物序列如SEQID No.3和SEQ ID No.4所示；ASP基因相对于GAPDH基因的表达水平计算使用2^-ΔCt，当ASP基因相对表达量值≥0.04可确定为日本品系，当ASP基因相对表达量值在0.04以下的为清溪乌鳖品系。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，qRT-PCR扩增的条件为：

反应体系：6.25μL SYBR预混染料、1μL cDNA模板、0.25μL各引物对、4.25μL ddH₂O，总体积为12μL；

扩增参数：95℃30s预变性，95℃15s变性、55℃30s退火、72℃30s延伸，40个循环后从65℃升温到95℃获得溶解曲线。