[发明专利]piRNA-26131在制备甲状腺癌诊断和预后标记物中的应用

说明书

本发明一方面提供piRNA‑26131在制备甲状腺癌诊断和预后标记物中的应用。本发明的第二方面提供piRNA‑26131在制备诊断甲状腺癌或判断甲状腺癌是否复发的试剂盒中的应用。此外，本发明还提供一种检测用于非诊断和治疗目的的检测甲状腺癌组织或血液中piRNA‑26131的方法。过表达或敲减piRNA‑26131后，甲状腺癌细胞的增殖及侵袭转移能力明显增强或减弱，piRNA‑26131高表达患者复发概率高，所以piRNA‑26131可以作为血液筛选分子标志物用于甲状腺癌患者的早期筛查和肿瘤复发指标，具有重要意义和应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及piRNA-26131在制备甲状腺癌诊断和预后标记物中的应用。

背景技术

甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤之一，约占全身恶性肿瘤的2％，且多发于40岁左右的青壮年，据统计显示甲状腺癌的发病率呈逐年增高趋势。目前临床对于甲状腺癌的早期诊断仍采用体检和影像学等有限的检查方法，具有一定的局限性，而且缺少预警价值。常用的诊断标志物容易与甲状腺炎、甲状腺结节相混淆，因而易造成误诊。随着分子生物学技术的不断进步，为了满足临床诊断提高灵敏度和特异性的要求，开发新的血液肿瘤标志物势在必行。

PIWI-interacting RNA(简称piRNA)为最新发现的一类小分子RNA，长度为 26～31nt单链非编码RNA，在基因表达调控和转座子抑制方面起重要功能作用。尽管早期研究表明piRNA在生殖系统发育中扮演者重要角色，但越来越多的研究报道发现piRNA与肿瘤发生密切相关。目前已有研究证实piRNA在子宫内膜癌、胰腺癌、胃癌、肝癌及乳腺癌等各类肿瘤中表达异常，且扰动这些肿瘤细胞中特定的piRNA能影响增殖、转移、侵袭等细胞恶性表型。另外，piRNA在维持基因组稳定，保障细胞细胞正常功能中起到重要作用。众所周知，哺乳动物中存在着转座子(Transposons)序列的DNA或mRNA，可将一段DNA序列嵌入至另一段DNA中。研究发现转子序列占基因组的近40％，一旦这种“jumping genes”发生混乱，将导致基因组毁灭性的灾难，导致肿瘤的发生。但是，目前缺少甲状腺癌与相关piRNA的报道。

发明内容

为了克服现有技术中的缺陷，本发明提供piRNA-26131在制备甲状腺癌诊断和预后标记物中的应用，piRNA-26131具有极好的组织特异性和相关性，并且扩大样本通过RT-PCR方法实时定量检测，为甲状腺癌的早期诊断和复发提供了新的分子标志物。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面是piRNA-26131在制备甲状腺癌诊断和预后标记物中的应用。

进一步地，piRNA-26131的基因序列为：

TTTGGCAATGGTAGAACTCACACTGGTGAGGT。

本发明的第二方面是提供piRNA-26131在制备诊断甲状腺癌或判断甲状腺癌是否复发的标记物中的应用。

本发明的第三方面是提供piRNA-26131在制备诊断甲状腺癌或判断甲状腺癌是否复发的试剂盒中的应用，所述试剂盒包括用于检测受试者组织中 piRNA-26131的表达水平的试剂。

进一步地，所述试剂盒包括用于检测受试者血液中piRNA-26131的表达水平的试剂。

本发明的第四方面是提供一种用于非诊断和治疗目的的检测甲状腺癌组织或血液中piRNA-26131的方法，包括如下步骤：

(1)血液及组织样本收集及处理；

(2)RNA抽提；

(3)RNA的定量和逆转录：使用分光光度计测定RNA的浓度后，配制逆转录反应液，设定程序参数；